Obtention de souris transgéniques exprimant la recombinase Cre sous le contrôle du promoteur du gène récepteur 2 à la vasopressine en vue d'inactiver CFTR dans le rein

par Lilia Hasseine

Thèse de doctorat en Aspects moléculaire et cellulaire de la biologie

Sous la direction de Michel Tauc.

Soutenue en 2003

à Nice .


  • Résumé

    Afin de déterminer le rôle exact de la protéine CFTR (considérée comme un canal Cl- activé par l’AMPc) dans le rein, nous avons choisi de générer un modèle murin présentant une inactivation génique de CFTR spécifiquement dans le rein en utilisant le système Cre/LoxP. Pour diriger l’expression de la recombinase Cre, nous avons choisi le promoteur du récepteur 2 à la vasopressine spécifique des canaux collecteurs, lieu d’expression de la protéine CFTR dans le rein. Nous avons cloné ce promoteur chez la souris. Des souris transgéniques ont été obtenues par des techniques classiques de transgénèse. Le génotypage des souris transgéniques a permis de détecter six lignées transgéniques. Le phénotypage de ces lignées est réalisé par des techniques de biologie moléculaire et d’immunohistochimie en croisant ces souris avec des souris transgéniques STOP/LacZ. Les résultats obtenus indiquent une expression fonctionnelle de la recombinase dans le rein mais aussi dans d’autres organes tels que la rate, le cerveau, le poumon ou l’intestin en fonction de la lignée étudiée. La lignée 5 présente la lignée la lus adéquate pour inactiver la protéine CFTR dans le rein.

  • Titre traduit

    Generation of transgenic mice expressing Cre recombinase under the controle of vasopressin receptor 2 gene promoter in order to inactivate CFTR in the kidney


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    CFTR, Cl-channel known to be implicated in the control of ionic channels or transporters present in renal tubules. However, it remains that the role of CFTR in the kidney homeostasis is not clearly established. Thus, to evaluate the physiological role of CFTR in the kidney, we decided to generate transgenic mice to invalidate CFTR specifically in this organ by the Cre/LoxP system. To direct the expression of Cre in the distal part of the kidney in which CFTR is expressed, we chose to clone the mouse renal specific promoter directing type 2 vasopressin receptor (V2R) expression. 6 transgenic strains expressing V2R-Cre transgenic were detected after PCR analysis. To assess the efficiency of Cre mediated site specific recombination, transgenic mice were mated with flox lacZ mice. Recombination events in pups were detected by PCR and Xgal staining in tissue sections. In one mouse strain (L5) Cre was functionally expressed in kidney. A second transgenic mouse strain which express a floxed CFTR gene is under construction. The inactivation of CFTR in the kidney will be obtained by mating of pV2R-Cre (L5) transgenic mouse strain with the floxed CFTR mouse strain.

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Informations

  • Détails : 139 f.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 126-139. Résumé en français

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  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : 03NICE4014bis
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  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 03NICE4014
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