Elaboration de particules magnétiques pour la capture spécifique et non spécifique d'acides nucléiques et pour la capture générique de virus

par Raphaël Veyret

Thèse de doctorat en Chimie

Sous la direction de Thierry Delair.

Soutenue en 2003

à Lyon 1 .


  • Résumé

    Ce travail a consisté à élaborer des particules magnétiques, à partir de gouttelettes de ferrofluide émulsifiées, dans le but d'étudier l'extraction et la purification de biomolécules. Pour ces applications, les particules doivent être de taille submicronique, rapidement séparables sous un champ magnétique et compatibles avec les enzymes des tests biologiques. Différentes méthodes ont été utilisées pour obtenir ces latex magnétiques. Ces particules ont d'abord été synthétisées par polymérisation, mais sans parvenir à obtenir une encapsulation homogène. L'étude c'est alors orientée vers l'élaboration de particules en suivant une stratégie basée sur l'adsorption alternée de couches de polyélectrolytes (procédé LBL). Ce procédé nous a permis d'obtenir des particules cationiques et anioniques, possédant une bonne stabilité colloi͏̈dale et pouvant être utilisées directement en RT-PCR. Les particules cationiques ont été utilisées pour la capture générique et spécifique d'acides nucléiques. La capture spécifique requiert la présence d'ODN de capture en surface des colloi͏̈des. La fixation de ces oligonucléotides a été réalisée de façon covalente à l'aide d'un copolymère réactif (AMVE). Les particules anioniques ont permis la capture générique du virus de la fièvre jaune et ont été testées sur le virus de la fièvre de Lassa. Le couplage de protéines sur ces particules a été évalué avec la streptavidine comme modèle.


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Informations

  • Détails : 1 vol. (243 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 236 Réf. bibliogr.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Claude Bernard (Villeurbanne, Rhône). Service commun de la documentation. BU Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : T50/210/2003/112bis
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