Mise en évidence chez les bovins d'un effet maternel sur la production d'embryons in vitro : étude des mitochondries ovocytaires et des réserves en ATP

par Manoel Augusto Monteiro Tamassia

Thèse de doctorat en Sciences animales. Reproduction bovine, biologie de la reproduction

Sous la direction de François Gallouin.


  • Résumé

    L'objectif de cette thèse, a été tout d'abord, d'essayer de mettre en évidence l'influence de la femelle donneuse sur la qualité de l'ovocyte chez la vache. Afin d'isoler le rôle de l'ovocyte dans le taux de développement embryonnaire, l'influence du tractus génital femelle a été supprimée par collecte des ovocytes dans les follicules (par Ovum Pick-Up ; OPU) puis par maturation, fécondation et culture in vitro. Ce protocole expérimental a été appliqué à deux situations physiologiques permettant d'explorer l'influence maternelle sous plusieurs approches. Tout d'abord, nous avons utilisé des génisses issues de clonage embryonnaire. Dans un second temps, ce protocole expérimental a été appliqué à 10 vaches d'origines familiales différentes (non apparentées). Ce sperme ne pouvait donc pas être considéré comme le facteur limitant du taux de développement. Nous avons ainsi démontré scientifiquement l'existence d'un effet maternel, c'est-à-dire d'une influence des facteurs maternels ovocytaires, sur le développement embryonnaire (in vitro). Ce travail a permis d'isoler des vaches donneuses d'ovocytes de " bonne " et " mauvaise " qualité. Nos recherches ont ensuite porté sur le(s) mécanisme(s) pouvant être responsable(s) de ces différences d'aptitude au développement in vitro entre femelles. Cette recherche a été plus particulièrement axée sur le métabolisme énergétique : réserves d'ATP, quantité de mitochondries (d'ADN mitochondrial) et séquence de l'ADN mitochondrial. Seules les mutations de l'ADN mitochondrial ont réellement permis de différencier les deux phénotypes de qualité ovocytaire. Ces travaux de thèse ont donné lieu à la rédaction de 3 articles (2 publiés, 1 soumis)

  • Titre traduit

    Maternal influence in bovine oocyte and in-vitro embryo production : study of oocytes' mitochondria and atp stores


  • Résumé

    The main objective of this thesis was to show the influence that the oocyte donor cow has over the oocyte quality measured by the embryo production in vitro. In order to isolate the effect of the oocyte on embryo production, we used the techniques of ovum pick-up (OPU), in vitro fertilisation (IVF) and culture (IVC) of embryos. These procedures were used to test the influence of oocytes in two distinct situations. Initially, the purpose was to test the in vitro embryo production in cloned cows (embryonic cloning). A second purpose was performed using ten cows with diverse genetic origins. In order to avoid the sperm induced variation on embryo production, only semen with good IVF rates from the same bull and from the same ejaculate was used. The results of this second study demonstrated scientifically the existence of a maternal effect over in vitro embryo production. This work allowed the identification of cows that produce oocytes of "good" and "bad" quality. After showing the existence of a maternal effect over in vitro embryo production, the research focused on the exploration of mechanisms that could be involved in such differences. Thus, the third experiment centered on the energetic metabolism of the oocyte, studying the oocytes' ATP reserves and the quantity of mitochondrial DNA and polymorphisms in the control region of the mitochondrial DNA. Only the study of mutations of the mitochondrial DNA control region was successful in differentiating the phenotypic variation in oocyte quality. This work resulted in the publication of two articles and a third one that was submitted for publication in international pier-reviewed journals.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (210 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 366 réf.

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  • Disponible pour le PEB
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