Etudes moléculaires de la voie de signalisation Hedgehog chez l'homme

par Nathalie Boutet

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et médicales. Biologie - Santé

Sous la direction de Michel Longy.

Soutenue en 2003

à Bordeaux 2 .


  • Résumé

    Les hedgehogopathies regroupent un ensemble de syndromes dysmorphiques héréditaires caractérisés par une altération de la voie de signalisation Hedgehog (Hh). Dans cette voie, le gène patched code pour un récepteur qui agit en opposition à la protéine Hh. En l'absence d'une protéine PTCH fonctionnelle, les facteurs de transcription GLI sont surexprimés. Chez l'homme, ptch1 est muté dans le syndrome de Gorlin ou Naevomatose baso-cellulaire, et gli3 est muté dans les syndromes de Greig (GCPS) et de Pallister-Hall (PHS). Nous avons étudié le spectre des mutations géniques dans 151 échantillons de patients atteints du qyndrome de Gorlin et 52 échantillons de patients présentant les syndromes GCPS et PHS, par différentes techniques dont la dHPLC. 27 mutations du gène ptch1 ont été identifiées, dont une mutation récurrente dans l'exon 8, et 5 mutations du gène gli3. Alors qu'il semble exister une corrélation génotype/phénotype dans les syndromes de Greig et Pallister-Hall, aucune corrélation n'a été identifiée dans le syndrome de Gorlin. Les patients atteints du syndrome de Gorlin développent des carcinomes baso-cellulaires (CBC), dans lesquels la protéine GLI1 est surexprimée. Nous émettons l'hypothèse que des oligonucléotides leurres, contenant le site de fixation de GLI1 sur l'ADN, pourraient capturer GLI1, empêchant la transactivation de gènes essentiels de la voie Hh et inhiber ainsi la prolifération. Nous avons construit un système expérimental in vitro basé sur la transactivation d'un gène rapporteur, la luciférase, par l'expression des prtéines GLI1 et GLI3, permettant ainsi de visualiser la fixation de GLI sur l'ADN. Malheureusement les essais d'inactivation de la surexpression de GLI1 par les oligonucléotides leurres se sont révélés négatifs.

  • Titre traduit

    Molecular Studies of the Hedgehog Signaling Pathway in Human


  • Résumé

    "Hedgehogopathy" defines in human a group of hereditary dysmorphic syndromes with an alteration of the Hedgehog (Hh) pathway. In this pathway, the patched gene encodes a receptor that acts in opposition to Hh protein. In the absence of a functional PTCH protein, GLI transcription factors are overexpressed. In human, ptch1 gene mutations are involved in Gorlin syndrome or Nevoid Basal Cell Carcinoma Syndrome, and gli3 is mutated in Greig syndrome (GCPS) and Pallister-Hall syndrome (PHS). We have studied gene mutations spectrum in 151 patients cases of Gorlin syndrome, 52 cases of Greig and Pallister-Hall syndromes, with different techniques including dHPLC. 27 ptch1 mutations have been identified, where one recurrent mutation in exon 8, and 5 gli3 mutations. While a phenotype-genotype correlation seems to exist in Greig and Pallister-Hall syndromes, no correlation was found in the Gorlin syndrome. Patients affected by Gorlin syndrome generally develop basal cell carcinoma (BCC), in which GLI1 protein is overexpressed. We hypothesize that decoy oligonucleotides containing the GLI1 DNA binding site would effectively bind GLI1, preventing the transactivation of essential genes of the Hh pathway and thereby inhibiting proliferation. In this way, we design an experimental in vitro system, based on the transactivation of a reporter gene, the luciferase, which allows the visualisation of GLI DNA binding. However we were unable to demonstrate any inactivation of GLI1 by using decoy oligonucleotides.

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Informations

  • Détails : 256 p.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 180 réf.

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  • Bibliothèque : Université de Bordeaux. Direction de la Documentation. Bibliothèque des Sciences du Vivant et de la Santé.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : CMTB 2003-990

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