Caractérisation de MLN64, une protéine sur-exprimée dans un quart des cancers du sein

par Fabien Alpy

Thèse de doctorat en Biologie moléculaire

Sous la direction de Marie-Christine Rio.

Soutenue en 2002

à l'Université Louis Pasteur (Strasbourg) .


  • Résumé

    Le cancer du sein est un problème majeur de santé publique. Un criblage différentiel de biopsies de métastases ganglionnaires de carcinomes mammaires avait permis d'isoler le gène MLN64 qui est amplifié et a une expression augmentée dans un quart des tumeurs mammaires. Pour mieux comprendre la sur-expression de MLN64 dans les cas de cancers du sein où le gène est amplifié, nous avons isolé le gène humain de MLN64 et caractérisé son promoteur. Nous avons montré qu'une courte région promotrice de MLN64 est suffisante pour permettre une expression forte et ubiquitaire du gène. Nous avons de plus déterminé que le facteur de transcription Sp1 active le promoteur de MLN64. La protéine MLN64 est composée de deux domaines, un domaine amino-terminal transmembranaire et un domaine START carboxy-terminal (Steroidogenic Acute Regulatory protein related lipid Transfer). Nous avons déterminé la localisation sub-cellulaire de la protéine MLN64. MLN64 est localisée sur la membrane périphérique des endosomes tardifs et son domaine START est cytoplasmique. Nous avons de plus montré que le domaine START de MLN64 est capable de lier in vitro le cholestérol. Ces données suggèrent que MLN64 ait un rôle dans le transport du cholestérol dérivé des lipoprotéines sanguines. Nous avons isolé et caractérisé une nouvelle protéine, MENTALHO (MLN64 N-terminal homolog), qui est constituée uniquement d'un domaine homologue au domaine amino-terminal de MLN64. MENTALHO et MLN64 sont ancrées dans la membrane des endosomes tardifs et elles ont toutes deux la même topologie,leurs extrémités amino- et carboxy-terminales étant cytoplasmiques. MENTALHO a, de plus, une propriété intrigante. En effet, la sur-expression de cette protéine conduit à l'accumulation d'endosomes tardifs géants dans les cellules, ce qui implique cette protéine dans la biogenèse des endosomes.


  • Résumé

    Breast cancer is a major public health problem. A differential screening of surgical specimen of axillary lymph node metastases derived from breast cancers allowed the isolation of MLN64 gene that is amplified and overexpressed in a quarter of mammary tumors. In order to better understand the overexpression of MLN64 in breast cancer cases where the gene is amplified, we have isolated the human MLN64 gene and characterized its promoter. We have shown that a short promoter region of MLN64 is sufficient to drive a high and ubiquitous expression of the gene. We also determined that the transcription factor Sp1 active MLN64 promoter. MLN64 protein is composed of two domains, an amino-terminus transmembrane domain and a carboxy-terminal START domain (Steroidogenic Acute Regulatory protein related lipid Transfer). We have determined the sub-cellular localization of MLN64 protein. MLN64 is located on the peripheral membrane of late endosomes, its START domain being cytoplasmic. We have also shown that the START domain of MLN64 is able to bind cholesterol. These data suggest that MLN64 have a role in the transport of lipoprotein-derived cholesterol. We have isolated and characterized a novel protein, MENTALHO (MLN64 N-terminal homolog), which is only constituted of a domain homologous to the amino-terminal domain of MLN64. MENTALHO and MLN64 are located on late endosome membrane and they both have the same topology, their amino- and carboxy-terminal extremities being cytoplasmic. MENTALHO has an intriguing property. When it is overexpressed it leads to the accumulation of giant late endosomes in cells, which implicate this protein in the biogenesis of endosomes.

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Informations

  • Détails : 153 f.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f.110-120

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Blaise Pascal.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.2002;4041
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