Ecophysiologie moléculaire de la tolérance à la sécheresse chez une Fabacée tropicale, Vigna unguiculata : clonage et étude d'un nouveau gène codant un inhibiteur de protéase

par Ndeye Ndack Diop

Thèse de doctorat en Sciences et ingénierie

Sous la direction de Yasmine Zuily-Fodil.

Soutenue en 2002

à Paris 12 .


  • Résumé

    Le criblage d'une banque d'ADNc de feuilles de Vigna unguiculata avec une sonde spécifique aux cystatines a permis de cloner et séquencer 4 ADNc : Vucystf-1, 2, 3 et 4. Deux sont complets (Vucystf-2 et 3). Vucystf-2 est le pré-ARNm de Vucystf-3. Le gène correspondant a été isolé. Les cystatines de feuilles de niébé sont des multicystatines composées d'au moins deux domaines présentant une identité de 45 à 69%. L'hybridation Northern a montré que deux ARNm sont transcrits en réponse au déficit hydrique. Leur accumulation est corrélée au niveau de déficit hydrique chez le cultivar résistant alors qu'il atteint son maximum en S2 chez le cv sensible. L'expression de la cystatine est également induite par la dessiccation et le traitement à l'acide abscissique, l'acide jasmonique, la blessure et la sénescence. L'analyse par RT-PCR montre une relation de précurseur à produit entre Vucystf-2 et 3. La protéine recombinante de Vucystf-3 présente une activité inhibitrice contre la papai͏̈ne.

  • Titre traduit

    Ecophysiology of drought tolerance in tropical Fabaceae, Vigna unguiculata L. (Walp. ) : cloning and characterization of a new gene coding for a cystein proteinase inhibitor


  • Résumé

    Screening of a cDNA library of Vigna unguiculata leaves using a new cystatin-specific probe allowed to clone and sequence 4 cDNA (Vucystf-1, 2, 3 and 4). Two of them are full length (Vucystf-2 and -3). Vucystf-2 is the pre-mRNA of Vucystf-3. The corresponding gene has been isolated and sequenced. Northern blot and RT-PCR analysis in treated leaves indicate that cystatin transcripts accumulate in response to drought. For the resistant cv, expression analysis revealed the presence of 2 transcripts, Vucystf-1 and -3, the former being constitutively produced while the later increased during the treatment. The susceptible cv shows 2 transcripts, maximum expression levels are observed for a moderate level of drought stress. Desiccation, wounding. Abscissic acid, jasmonic acid, and senescence also trigger the expression of cystatin genes. Recombinant Vucyst-3 protein showed a strong inhibitory activity against papai͏̈n.

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Informations

  • Détails : 138 p.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 113-132

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  • Bibliothèque : Université Paris-Est Créteil Val de Marne. Service commun de la documentation. Section multidisciplinaire.
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