Thèse soutenue

Topologie des sites actifs des cytochromes P450 2C8 et 2C9 de foie humain : étude de leur spécificité de substrats et utilisation de la structure RX du CYP 2C5 comme référence

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Auteur / Autrice : Cristina Marques-Soares
Direction : Daniel Mansuy
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques
Date : Soutenance en 2002
Etablissement(s) : Paris 11

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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Pour étudier la topologie des sites actifs des CYP 2C9 et 2C8 humains, nous sommes partis de la première structure RX résolue d'un cytochrome P450 membranaire, le CYP 2C5 de lapin, fortement homologue aux CYP 2C humains. Nous avons tout d'abord construit un modèle 3D du CYP 2C9 par mutagenèse virtuelle du CYP 2C5. Ce travail ainsi qu'une étude de mutants du CYP 2C9 nous ont permis de souligner l'importance de certains résidus du CYP 2C9 dans sa reconnaissance et son oxydation des substrats. Dans un deuxième temps, nous avons élaboré de même un modèle 3D du CYP 2C8, tout en construisant indépendamment un pharmacophore de ses substrats. En confrontant les résultats de ces deux approches, nous avons proposé un modèle d'interaction du CYP 2C8 avec ses substrats. De plus le CYP 2C8 présent dans les vaisseaux sanguins semble être impliqué dans la régulation de la vasodilatation. En étudiant l'effet sur le CYP 2C8 de dérivés de voies impliquées dans la vasodilatation, les voies de la biosynthèse de NO et de la cascade arachidonique, nous avons identifié certains produits capables d'inhiber le CYP 2C8 in vitro. Enfin, nous avons trouvé des substrats et inhibiteurs communs aux CYP 2C5 et 2C humains, qui ont été cristallisés avec le CYP 2C5 par l'équipe de E. F. Johnson (La Jolla). Les structures RX obtenues ont permis de montrer une grande aptitude de l'enzyme à s'adapter a chacun de ses substrats. Ces résultats seront discutés en relation avec le comportement des cytochromes P450 2C humains.