Implication de Cak1 (CDK activating kinase) dans le processus de transcription par l'ARN polymérase II chez Saccharomyces cerevisiae

par Carine Ganem

Thèse de doctorat en Biologie

Sous la direction de Gérard Faye.

Soutenue en 2002

à Paris 11, Orsay .


  • Résumé

    Chez la levure S. Cerevisiae, les rôles physiologiques connus de la protéine essentielle Cak1 (kinase activatrice des kinases cycline-dépendantes (CDK)) sont de phosphoryler Cdc28, régulateur majeur du cycle cellulaire, ainsi que Kin28, kinase du domaine carboxy-terminal de la plus grosse sous-unité de l'ARN polymérase II. Des mutants conditionnels de cakI semblent affectés dans le contrôle du cycle cellulaire, mais aussi dans la formation de la paroi des spores, la différentiation pseudohyphale, ainsi que dans la réponse au stress osmotique. Dans ce travail, nous avons montré que Cak1 est impliquée dans le processus de transcription non seulement via la phosphorylation de Kin28, mais également via le complexe transcriptionnel multimérique Paf1 et via la protéine Ssu72. Une étude plus poussée de Ssu72 nous a permis de dévoiler sa nature de protéine phosphatase, et les liens étroits, tant génétiques que moléculaires, qu'elle tisse avec plusieurs autres protéines impliquées dans l'expression des gènes, telles que Sua7 (TFIIB), Kin28, Pafl, Ctr9 ou Fcp1. La multiplicité des effets des mutations dans le gène CAK1 pourrait ainsi s'expliquer par un rôle de modulateur de l'activité de transcription.


  • Résumé

    In the budding yeast S. Cerevisae, the known physiological roles of the essential protein Cak1 (Cyclin-dependant kinases (CDKs) Activating Kinase) are to phosphorylate Cdc28, the main regulator of progression through cell cycle, and Kin28, the carboxy-terminal domain (CTD) kinase of the largest RNA polymerase II subunit. Conditionnal mutants of cakl appear affected in cell cycle control, but also in spore-wall morphogenesis, pseudohyphal differentiation, and response to high osmolarity. In this work, we show that Cak1 is implicated in transcription process not only through Kin28 phosphorylation, but also through the multimeric transcriptional complex Paf1 and the Ssu72 protein. A more extensive study of Ssu72 enabled us to reveal its phosphatase activity, as well as its genetic and molecular interactions with several other proteins involved in gene expression, such as Sua7 (TFIIB), Kin28, Paf1, Ctr9 or Fcp1. Thus, the multiple effects of cakl mutations could be explained by the role of Cak1 as a modulator of transcriptional activity.

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Informations

  • Détails : 161 p.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p.136-152,

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  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : M/Wg ORSA(2002)180
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