Etude de la biosynthèse et de la production d'alcaloi͏̈des tropaniques par les racines transgéniques de Datura
par Arnaud Lanoue
Thèse de doctorat en Sciences. Biotechnologie végétale
Sous la direction de Michèle Boitel-Conti et de Philipp Christen.
Soutenue en 2002
à Amiens .
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Résumé
La croissance et la production en métabolites de deux clones de racines transgéniques de Datura ont été caractérisées en fioles. L'ajout combiné de l'acide (RS)-phényllactique et du Tween a permis d'amplifier la diffusion de l'hyoscyamine dans le milieu de culture et d'augmenter l'accumulation totale de l'hyoscyamine de 60%. La vitesse apparente de biosynthèse de l'hyoscyamine est deux fois inférieure à celle de la littorine suggérant que la réaction d'isomérisation pourrait être une étape limitante dans la voie de biosynthèse. La croissance et la respiration des racines transgéniques ont été déterminés en bioréacteur en utilisant un système d'acquisition en ligne des mesures de conductivité du milieu de culture, de l'oxygène et du dioxyde de carbone. Ces études ont permis de mettre en évidence qu'un rythme circadien endogène persiste chez les racines transformées de D. Innoxia. Enfin, un procédé de production semi-continue de scopolamine dans un bioréacteur de 16 litres a été testé.
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