Le métabolisme des polyosides chez Clostridium acetobutylicum : étude fonctionnelle du cellulosome

par Fabrice Sabathe

Thèse de doctorat en Microbiologie moléculaire et biotechnologie

Sous la direction de Philippe Soucaille.

Soutenue en 2002

à Aix-Marseille 1 , en partenariat avec Université de Provence. Section sciences (autre partenaire) .


  • Résumé

    Clostridium acetobutylicum est une bactérie sporulante, anaérobie stricte et capable de produire des solvants (acétone et butanol). Les résultats du séquençage du génome C. Acetobutylicum ont révélé la présence d'un cluster de gènes codant potentiellement pour un cellulosome de structure semblable à celui de C. Cellulolyticum. Ce cluster, contient dans l'ordre : cipA (protéine charpente CipA), celA (Cel48A), celB (Cel5B), celC (Cel9C), orfX (protéine non enzymatique Orfxp), celD (Cel5D), celE (Cel9E), celF (Cel9F), celG (cel5G) et celH (Cel9H). La pre��sence d'un tel cluster est surprenante dans la mesure où C. Acetobutylicum est incapable d'utiliser la cellulose comme source de carbone. La caractérisation biochimique de ce cellulosome (SDS PAGE, séquençage N terminal et Western blotting) a été entreprise. Les résultats ont permis de mettre en évidence la présence d'au moins 4 protéines cellulosomales (CipA, Cel48A, Cel9C et Cel9X) capables de s'assembler au sein d'un complexe cellulolytique de haut poids moléculaire. La caractérisation biochimique de ces composants a été effectuée.

  • Titre traduit

    The Clostridium acetobutylicum sugar metabolism : characterization of the cellulosome


  • Résumé

    Clostridium acetobutylicum is a strictly anaerobic spore forming bacteria able to produce solvents (acetone and butanol). Analysis of the genome nucleotide sequence revealed the presence of a cellulosomal gene cluster similar to that of C. Cellulolyticum. This cluster contains the following genes: cipA (scaffolding protein CipA), celA (Cel48A), celB (Cel5B), celC (Cel9C), orfX (Orfxp), celD (Cel5D), celE (Cel9E), celF (Cel9F), celG (cel5G) and celH (Cel9H). As C. Acetobutylicum is unable to grow on cellulosic substrates, the existence of a cellulosomal gene cluster in the genome is surprising. Biochemical evidence for the expression of a cellulosomal complex (SDS PAGE, N-terminal sequencing and Western blotting) was investigated. Results revealed that at least 4 major cellulosomal proteins are present (CipA, Cel48A, Cel9C and Cel9X) and are able to be associated into a large cellulolytic complex. Biochemical characterization of these components was done.

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Informations

  • Détails : 207 f.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 179-207

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  • Bibliothèque : Université d'Aix-Marseille (Marseille. St Charles). Service commun de la documentation. Bibliothèque universitaire de sciences lettres et sciences humaines.
  • Disponible pour le PEB
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