Etude de la fonction du facteur de transcription ytaf 25 (levure) et ses homologues in vivo

par DORIS-REATE KRSCHNER

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de Laszlo Tora.

Soutenue en 2001

à Strasbourg 1 .

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  • Résumé

    La formation du complexe de preinitiation (pic) est une etape essentielle pour la regulation de la transcription des genes de classe ii. Le facteur general de transcription tfiid joue un role primordial dans l'assemblage du pic sur les promoteurs des genes. Tfiid est un complexe multi-proteique, compose de tbp et des taf s, qui est conserve au cours de l'evolution. Taf 25 dans la levure, taf 30 chez l'humain et les deux homologues dtaf 16 et dtaf 24 dans la drosophile, sont consideres comme des coregulateurs de l'initiation de la transcription. Ces memes cofacteurs ont par ailleurs ete trouves dans deux complexes de transcription, tfiid et saga dans la levure et tfiid, tftc et pcaf chez l'homme. Les travaux effectues dans le cadre de cette these ont ete realises dans le but de caracteriser les fonctions in vivo du cofacteur de transcription ytaf 25 et de ses homologues, chez l'homme et la drosophile. La region minimale de ytaf 25 essentielle pour la viabilite de la levure a ete determinee par test de complementation, dans une souche ou le gene codant pour ytaf 25 a ete inactive par recombinaison homologue. Par ailleurs, nous avons demontre que dans cette region, qui contient un repliement putatif de type histone, les deux premieres helices de la region n-terminale sont fonctionnellement echangeables entre la levure et l'homme, pour les deux systemes testes. Differentes mutations ponctuelles et diverses deletions ont ete effectuees afin de determiner la region precise de cette proteine correspondant a sa fonction. Il a ete observe que certains des alleles mutes sont sensibles a la temperature, et causent un arret dans differentes phases du cycle cellulaire. De maniere importante, les differentes mutations dans la proteine ytaf 25 affectent la transcription differentiellement pour les genes testes. L'analyse de ces mutants a montre que la proteine ytaf 25 est impliquee, au sein du complexe tfiid ou du complexe saga, dans la transcription des genes, qui influencent la morphologie cellulaire, l'organisation nucleaire, la progression dans les differentes etapes du cycle cellulaire et la transcription, de maniere directe ou indirecte. L'analyse a grande echelle des variations d'expression des genes entre differents mutants (par puce d'adn) qui est en cours, nous permettra de grouper les differents genes menant a des phenotypes particuliers.

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Informations

  • Détails : 156 p.
  • Annexes : 620 ref.

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