Polymerisation de l'actine, signalisation et mouvement : reconstitution du mouvement de listeria monocytogenes et shigella flexneri

par Rajaa Boujemaa-Paterski

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de MARIE-FRANCE CARLIER.

Soutenue en 2001

à Paris 11 .

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  • Résumé

    L'analogie entre la propulsion de listeria et la protrusion du lamellipode a defini la motilite des bacteries comme modele de choix pour aborder le mecanisme du mouvement base sur la polymerisation de l'actine. Nous avons reconstitue in vitro le mouvement de listeria monocytogenes et shigella flexneri, ce qui a apporte deux resultats majeurs : i) la force de propulsion resulte uniquement de la conversion en force motrice de l'energie libre d'hydrolyse de l'atp associee a la polymerisation de l'actine, aucun moteur moleculaire n'est implique ; ii) l'identification des proteines essentielles pour la mise en place et le maintien du mouvement. L'adf et les proteines de coiffe de l'extremite barbee assurent le maintien d'une concentration stationnaire elevee en actine monomerique. La croissance selective et localisee des filaments par leurs extremites barbees a la surface des bacteries resulte des activites combinees du complexe arp2/3 stimulateur de la polymerisation de l'actine et des proteines de coiffe de l'extremite barbee dynamique du filament. Le complexe arp2/3 initie le branchement des extremites barbees ; on observe le branchement a la surface de la bacterie. La reconstitution de la motilite des bacteries a permis d'elucider la fonction acceleratrice de proteines qui augmentent l'efficacite du mouvement sans pour autant etre necessaires, comme la profiline humaine, ciboulot de drosophile, l'actobindine de acanthamoeba castellanii, vasp et l'-actinine. Ce test a confirme les resultats de l'analyse physico-chimique de ciboulot et de l'actobindine et montre leur homologie fonctionnelle avec la profiline. L'etude du mecanisme d'activation de complexe arp2/3 par la proteine de surface acta de listeria a revele les sequences de acta impliquees dans la fixation du complexe arp2/3 et de l'actine monomerique, et l'homologie fonctionnelle entre acta et les proteines de la famille wasp en catalysant le branchement de l'extremite barbee des filaments par arp2/3 active.


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Informations

  • Détails : 234 p.
  • Annexes : 165 ref.

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  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
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