Recherche et analyse des éléments moléculaires qui permettent aux toxines animales de lier les canaux KV1

• Auteur / Autrice : Judith Racapé
• Direction : André Ménez
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Paris 11

Mots clés

Mots clés contrôlés

Toxines

Résumé

Dans le but de définir les éléments moléculaires qui permettent aux toxines animales de lier les canaux KV1, nous nous sommes intéresses dans ce travail a l'interaction de deux toxines, la BGK, une toxine purifiée a partir d'une anémone de mer et l'-dendrotoxine (DTX), une toxine purifiée a partir du venin de mamba vert, avec deux canaux homotetrameriques kv1. 1 et KV1. 2. Dans une première partie, les sites fonctionnels par lesquels la BGK et la DTX lient les canaux homotetrameriques KV1. 1 et KV1. 2 ont été identifies. Les sites fonctionnels de la dtx sont très voisins et sont constitues des mêmes résidus en n-terminal de la toxine. Pour la BGK, les sites fonctionnels sont constitues de résidus communs et de résidus différemment impliques selon le sous-type de canal considère. En particulier, il a été montre que l'analogue BGK(F6a) est 300 fois plus affin pour KV1. 1 que pour KV1. 2. Dans une seconde partie, le profil pharmacologique de la BGK a été modifie afin d'obtenir un ligand plus sélectif pour un ou plusieurs canaux KV1. La substitution f6a a été introduite dans un analogue iodable de la BGK : la BGK (W5Y, Y26f). Il s'est avère que la BGK (W5y, F6a, Y26f) est plus sélective des sous-types de canaux kv1. 1 et kv1. 6 que des sous-types KV1. 2 et KV1. 3. De plus, ce radioligand lie une sous-population des récepteurs de la BGK(w5y, y26f). La 1 2 5iBGK(w5y, f6a, y26f), avec son profil de sélectivité unique, constitue ainsi un nouvel outil pharmacologique. Dans une troisième partie, pour mieux comprendre l'interaction des toxines avec les canaux kv1, un modèle structural BGK-KV1. 1 a été construit. En utilisant des contraintes de distances définies par les cycles de double mutations et en procédant a la modélisation de la région p du canal kv1. 1, a partir de la structure cristallographique d'un canal potassium bactérien KCSA (Doyle et al. , 1998), deux modèles structuraux de la BGK ont été construits. Dans ces deux modèles, la BGK se place sur deux sous-unités du canal et le résidu k25 de la toxine plonge dans le pore du canal. Le modèle structural BGK-kv1. 1 a été ensuite compare aux sites fonctionnels de la BGK et aux autres modèles toxines-canaux KV1. Ceci a permis d'émettre certaines propositions quant à l'interaction des toxines animales avec les canaux KV1.