Contribution a l'etude de la fonction et de l'expression du gene rna14 implique dans la polyadenylation des arn messagers chez saccharomyces cerevisiae

par CYRIL BRENDOLISE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de FRANCOIS LACROUTE.

Soutenue en 2001

à PARIS 11, ORSAY .

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  • Résumé

    Le produit du gene rna14 intervient au sein du complexe cf1 dans la polyadenylation de l'extremite 3 des arn messagers. La proteine rna14p est localisee a la fois dans le noyau et dans le cytoplasme. La localisation nucleaire de la proteine est en accord avec son intervention dans la maturation des messagers, en revanche sa localisation cytoplasmique suggere qu'elle pourrait avoir une seconde fonction dans ce compartiment. Afin de determiner cette seconde fonction, nous avons isole et caracterise 13 nouveaux mutants du gene rna14. Ces mutants se repartissent dans deux classes distinctes : la classe des poly(a)moins regroupe les mutants qui presentent une chute du taux d'arn messagers polyadenyles et sont deficients pour les deux etapes de la reaction de polyadenylation ; les mutants de la classe des poly(a)plus presentent quant a eux un taux de poly(a) equivalent a celui d'une souche sauvage et ne sont pas quantitativement touches dans la polyadenylation ni dans les principales etapes du metabolisme des arn messagers. Des experiences de fractionnement cellulaire ont confirme que la proteine rna14p est majoritairement localisee dans le cytoplasme et plus precisement situee a l'interieur des mitochondries. Cependant, nous avons montre que les mutants poly(a)plus ne sont pas deficients dans la respiration ni dans l'expression du genome mitochondrial, et le role de la proteine rna14p dans la mitochondrie n'a pas encore ete determine. Par ailleurs, nous avons entrepris l'etude de l'expression du gene rna14 au travers de la caracterisation du mutant poly(a)plus rna14-5, qui est le seul de cette classe a presenter une forte accumulation de messager rna14. La regulation du gene rna14 semble avoir lieu au niveau transcriptionnel mais egalement au niveau de la stabilite du messager et de sa localisation intracellulaire. Nous avons montre que l'effet de la mutation rna14-5 est lie a la modification de la proteine rna14p ; de plus, la region 3 non traduite du messager rna14 est necessaire a l'accumulation de ce messager dans la souche mutante et pourrait etre responsable de l'adressage mitochondrial de la proteine.

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Informations

  • Détails : 218 p.
  • Annexes : 381 ref.

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  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
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