Transfert de gênes cible vers les tumeurs : conception, synthèse et propriétés de nouveaux vecteurs chimiques de l'ADN pour le ciblage des cellules cancéreuses
Auteur / Autrice : | Christophe Masson |
Direction : | Michel Bessodes |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences médicales |
Date : | Soutenance en 2001 |
Etablissement(s) : | Paris 6 |
Résumé
Les lipides cationiques sont parmi les agents chimiques les plus efficaces pour le transfert de gênes in vitro : ils forment avec l'ADN des particules appelées lipoplexes capables de transporter le gêne thérapeutique jusqu'au noyau des céllules. Malheureusement, ces systèmes interagissent non spécifiquement avec les milieux biologiques ce qui résulte en une faible sélectivite et une mauvaise efficacité in vivo. Cette thèse a pour objectif de concevoir des vecteurs chimiques induisant un transfert de gênes sélectif vers les tumeurs après injection intraveineuse. Les voies d'activation du polyethylene glycol (peg) mises au point au début de ce travail ont d'abord permis la synthèse de dérives lipidiques du peg. L'enrobage des lipoplexes par ces polymères modifie la bio-distribution et diminue les interactions non spécifiques de ces particules mais entraine une forte inhibition de leur pouvoir transfectant. Deux stratégies ont été développées pour augmenter sélectivement le transfert de gênes dans les tumeurs : la fixation de l'acide folique à l'extremité des lipides pegyles pour induire une reconnaissance spécifique par le recepteur au folate sur-exprime en surface des cellules cancéreuses, et la synthese de lipides pegyles comportant une fonction orthoester dégradable à faible ph pour exploiter l'acidite naturelle des tissus tumoraux. Les premiers résultats obtenus in vitro et in vivo avec ces deux strategies sont prometteurs : certains dérivés de l'acide folique sont reconnus de manière sélective et compétitive par le récepteur au folate et l'hydrolyse selective de la fonction orthoester dans les tumeurs permet d'y accroitre selectivement le transfert de gênes. La dernière partie de cette thèse est dediée à l'optimisation du trafic intracellulaire du gêne thérapeutique : l'incorporation d'une fonction orthoester dans la structure des lipides cationiques devrait favoriser la liberation de l'ADN dans la cellule par hydrolyse dans les endosomes.