Sur quelques aspects de la dynamique des microtubules et de la duplication du centrosome dans l'ovocyte de xenope

par THOMAS KUNTZIGER

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de MICHEL BORNENS.

Soutenue en 2001

à Paris 6 .

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  • Résumé

    La stathmine est une proteine ubiquitaire phosphorylee sur quatre serines apres l'activation de voies de signalisation par des effecteurs extracellulaires. La recherche de proteines de destabilisation des microtubules a conduit a l'isolement de la stathmine. De nombreuses etudes in vivo ont demontre que l'activite de destabilisation de la stathmine etait abolie par la phosphorylation de ses quatre sites. Nous avons mis en evidence l'existence d'une phosphorylation de la stathmine dependante des microtubules. L'assemblage de microtubules dans des extraits mitotiques d'ovocytes de xenope conduit a l'apparition de nouvelles isoformes phosphorylees specifiquement sur la serine 16. Cette phosphorylation sur la serine 16 de la stathmine est le fait d'une activite associee aux microtubules et est responsable de l'hyperphosphorylation de la stathmine precedemment decrite dans les extraits d'ovocytes de xenope apres l'addition de chromatine mitotique. Nous avons voulu evaluer les effets de la perturbation du reseau de microtubules dans un systeme embryonnaire. Ainsi un mutant non-phosphorylable de la stathmine bloque les divisions cellulaires dans des embryons de xenope, entraine un raccourcissement de la taille des fuseaux assembles dans des extraits mitotiques et empeche la phosphorylation dependante des microtubules de la stathmine endogene. Le mutant pseudophosphorylee est lui sans effet apparent. Une accumulation de la stathmine au niveau des poles est egalement decrite. Nous avons aussi contribue a l'analyse fonctionnelle de la centrine 3 humaine (hscen3p), une proteine tres proche de la proteine sccdc31p de saccharomyces cerevisiae impliquee dans la duplication du spb. La micro-injection de hscen3p dans des embryons de xenope entraine un ralentissement des cycles de division et de duplication du centrosome. Nous avons isole et sequence l'adnc de xlcen3 et commence a caracteriser ses effets sur la duplication du centrosome dans des extraits d'ovocytes de xenope.

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Informations

  • Détails : 208 p.
  • Annexes : 455 ref.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Disponible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 2001
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