Étude de la voie de signalisation du "Hypoxia Inducible Factor-I" (HIF-1) menant à l'induction du "Vascular Endothelial Growth Factor" (VEGF) impliqué dans le phénomène de néovascularisation tumorale

par Emmanuel Gothié

Thèse de doctorat en Sciences. Biologie moléculaire

Sous la direction de Gilles Pagès.

Soutenue en 2001

à Nice .


  • Résumé

    Le régulateur clef de la réponse cellulaire à l'hypoxie HIF-1 est un hétérodimère constitué des sous-unités HIF-1alpha et HIF-1beta/ARNT1 (Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator-1) membres de la superfamille des protéines à domaines bHLH/PAS. Pour étudier le facteur HIF-1, nous avons cloné par RT-PCR (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction) les deux ADN complémentaires (ADNc) du HIF-1 humain. Lors de cette étape, nous avons isolé deux clones d'ADNc supplémentaires pour HIF-1alpha résultant d'épissages alternatifs. Le premier clone présente l'ajout de trois paires de bases entre les exons 1 et 2, et le second, l'absence de l'exon 14 en plus de la modification précédente. Cette dernière isoforme est étudiée en détail. Nous développons également un système d'étude des étapes d'activation du HIF-1. Ce système est basé sur l'expression du gène cytostatique MKP3 (phosphatase spécifique des p42/p44 MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase)) sous contrôle d'éléments de réponse à l'hypoxie (HRE) fixant HIF-1. Une des constructions développées inhibe fortement la croissance cellulaire en hypoxie. Des constructions similaires doivent permettre d'isoler des mutants de la voie de signalisation du HIF-1, non affectés par ces dernières. Il est également possible d'envisager leur utilisation en thérapie génique anticancéreuses dans les zones hypoxiques des tumeurs extrêmement résistantes à la radiothérapie.

  • Titre traduit

    Study of the Hypoxia Inductible Factor-1 (HIF-1) signaling pathway leading to the induction of Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) and implicated in tumor angiogenesis


  • Résumé

    HIF-1, the key component of the hypoxia signaling pathway, is a heterodimer composed of two members of the basic helix-loop-helix transcription factor superfamily containing a PAS (PER-ARNT-SIM) domain : HIF-1alpha and HIF-1beta/ARNT. Cloning of human HIF-1 subunits by reverse transcriptase-polymerase chain reaction, revealed two alternatively spliced variants of the HIF-1alpha gene. Both variants possess three additional base pairs between exons 1 and 2. In addition, one lacks 127 base pairs comprising exon 14. This latter isoform was characterized in detail. In order to genetically dissect signal transduction mechanisms involved in the activation of HIF-1, we have developed a novel cell system which should allow us to select mutants of the HIF-1 pathway. This model is based on HIF61-dependent expression of the cytostatic protein, MKO3 (Mitogen-activated protein Kinase Phosphatase-3) a specific p42/p44 MAPK phosphatase. In one cell line obtained to date, cell growth is severely compromised under hypoxic conditions. This cell line should serve as a preliminary tool for the study of HIF-1 activation and prove to be helpful in the selection of additional mutants. In the future, DNA constructs which shut down cell growth in hypoxic zones of solid tumors, resistant to radiation therapy, may be useful for gene therapy.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 140 f.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 114-137. Résumés en français et en anglais

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Nice Sophia Antipolis. Service commun de la documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 01NICE5638
  • Bibliothèque : Université Nice Sophia Antipolis. Service commun de la documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 01NICE5638bis
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.