Etude et caractérisation, par techniques in situ, de couches électroactives destinées à l'hybridation de l'ADN pour l'élaboration de capteurs et de biopuces

par Nathalie Lassalle

Thèse de doctorat en Electrochimie

Sous la direction de Éric Vieil.

Soutenue en 2001

à Grenoble INPG .


  • Résumé

    L'objectif de ce travail est de detecter l'hybridation de sequences d'adn par differentes techniques autres que la fluorescence. Le principe recherche est de traduire directement le phenomene d'hybridation, en un signal exploitable physiquement en utilisant les proprietes d'un polymere conducteur electronique, le polypyrrole. Les copolymeres composes de monomeres pyrroles et de pyrroles fonctionnalises par des oligonucleotides (odn) sont synthetises a partir d'un protocole developpe au laboratoire. L'appariement des brins d'odn a ete suivi en temps reel et/ou une fois la reaction achevee, par diverses techniques de caracterisation electrochimiques, gravimetrique et optique. Des reponses peu specifiques ont ete obtenues par voltamperometrie cyclique et conductivite in situ, car ces dernieres n'ont pas permis de differencier categoriquement les processus d'hybridation et d'adsorption. Cependant, grace a ces etudes, nous pouvons proposer une explication sur les phenomenes ayant lieu a l'interface polymere solution lors de l'hybridation et de l'adsorption. Les mesures d'admittance, sur reseau de microelectrodes, ont montre la possibilite de detecter l'association entre deux brins complementaires, mais avec une faible sensibilite. En revanche la microbalance a quartz (mbq) et la spectroscopie de photocourant se sont averees etre des outils interessants pour caracteriser l'appariement des sequences d'adn. Nous avons mis au point une mbq tres sensible qui peut detecter une masse d'odn complementaires de l'ordre de quelques nanogrammes, ce qui a permis de realiser un biocapteur reproductible et reversible. Les mesures de spectroscopie de photocourant ont ete faites en fin de cinetique et en temps reel. De plus, ces deux techniques


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Informations

  • Détails : 1 vol. (144 p.)
  • Annexes : 19 ref.

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