Approches structurales de la sous-unité epsilon de l'ATP synthase de levure Saccharomyces cerevisiae

par Céline Aznar Derunes

Thèse de doctorat en Chimie organique

Sous la direction de Philippe Picard.

Soutenue en 2001

à Bordeaux 1 .


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  • Résumé

    L'ATP synthase est un complexe enzymatique indispensable à la synthèse d'ATP, donc à la vie de toute cellule. Sa tige centrale paraissant très fortement impliquée dans les changements conformationnels, donc dans le mécanisme énergétique, nous nous sommes consacrés à son étude structurale. L'ATP synthase mitochondriale de la levure Saccharomyces cerevislae a constitué notre modèle d'étude et l'une de ses composantes, la sous-unité epsilon, a été au centre de notre travail. Nous avons déterminé les conditions expérimentales de synthèse et de purification à mettre en oeuvre pour l'obtenir pure. Son comportement structural dans différents systèmes de solvants à été analysé par dichroïsme circulaire, chromatographie par perméation de gel, spectrométrie de masse et électrophorèse. Sa forte tendance à s'agréger a été montrée. Les études RMN dans un solvant micellaire, nous ont permis d'identifier 33 systèmes de spins, de définir deux zones hélicoïdales de 19 et 9 résidus et de modéliser la structure 3D des 20 premiers résidus. Sa complexation avec sa partenaire naturelle dans la tige centrale, la sous-unité delta que nous avons obtenue par la méthode biologique de surexpression, a été réalisée. Un modèle moléculaire de la tige centrale de levure a été également construit, montrant les interactions entre les trois sous-unités gamma-delta-epsilon et le rôle de maintien de l'édifice moléculaire central joué par la sous-unité epsilon.

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Informations

  • Détails : 174 p.
  • Notes : Reproduction de la thèse autorisée
  • Annexes : Bibliogr. p. 150-169

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  • Bibliothèque : Université de Bordeaux. Direction de la Documentation. Bibliothèque Sciences et Techniques.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : FTA 2378
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