Apports de la transgenese a la comprehension du metabolisme des monoterpenes chez differentes especes de menthe

par FLORENCE DIEMER

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de MONIQUE COLSON.

Soutenue en 2000

à SAINT ETIENNE .

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  • Résumé

    Le metabolisme des monoterpenes chez la menthe (mentha ssp. ) a ete etudie en employant une strategie de transgenese. Dans ce but, la regeneration de plantes in vitro a d'abord ete recherchee chez diverses especes de menthe. Une premiere methode a ete mise au point a partir de protoplastes isoles chez plusieurs cultivars de m. X piperita et appliquee sur des essais de fusion somatique par electrofusion entre m. X piperita et m. Spicata. Un second protocole de regeneration a ete etabli a partir de disques foliaires en utilisant une succession de deux milieux de culture. Six especes differentes de menthe ont ete regenerees avec des taux allant jusqu'a 85% chez m. Arvensis. Cette derniere methode a ete employee pour transformer genetiquement, par agrobacterium tumefaciens, m. X piperita, m. Spicata et m. Arvensis, avec les genes de la neomycine phosphotransferase ii et de la -glucuronidase. M. X piperita et m. Arvensis ont ensuite ete transformees avec le gene de m. Spicata, codant pour la 4s-limonene synthase intervenant dans une des premieres etapes de la synthese des monoterpenes. Dans les plantes transformees, l'integration du transgene a ete verifiee par pcr (polymerase chain reaction) et southern blots, sa transcription par reverse transcriptase-pcr et son expression par des dosages enzymatiques et une analyse de l'huile essentielle par chromatographie en phase gazeuse. Des modifications des profils terpeniques ont ete observees, conduisant a des hypotheses de surexpression et de cosuppression de genes, respectivement chez m. X piperita et m. Arvensis.

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Informations

  • Détails : 207 p.
  • Annexes : 194 ref.

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  • Bibliothèque : Université Jean Monnet. Service commun de la documentation. Section Sciences.
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