Analyse structurale d'endotoxines bacteriennes : exemples au sein des genres bordetella et yersinia

par LAURENT AUSSEL

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de MARTINE CAROFF.

Soutenue en 2000

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Les endotoxines sont les constituants majeurs du feuillet externe de la membrane externe des bacteries a gram-negatif. Ces macromolecules sont de puissants immunomodulateurs, responsables d'activites aussi bien nefastes que benefiques. Chimiquement, ce sont des melanges de lipopolysaccharides (lpss) qui possedent une region lipidique ancree dans le feuillet externe de la membrane (le lipide a) et une region osidique qui porte les determinants antigeniques de la bacterie. Ce travail porte sur l'analyse structurale des endotoxines de bordetella hinzii et b. Trematum. B. Hinzii est opportuniste pour l'homme, et a ete isolee chez des patients immunodeprimes, alors que b. Trematum a ete isolee dans des cas d'infections auriculaires ou sur des plaies infectees. Dans une premiere partie, une methode de liberation selective des acides gras par traitement alcalin est presentee. Cette technique a ete appliquee a l'etude de lipides a appartenant au genre yersinia dont les structures fines n'avaient pas encore ete resolues, parmi lesquels y. Pestis, l'agent de la peste. Nous avons ainsi pu mettre en evidence une nouvelle variabilite structurale presente au niveau des lipides a de ce genre bacterien. Dans une seconde partie, l'analyse structurale des lpss de b. Hinzii est presentee. De nombreuses techniques analytiques ont ete utilisees, et principalement deux methodes : la spectrometrie de masse de desorption par plasma (pdms) et la spectrometrie de masse par desorption laser assistee par matrice (maldi). Nous avons determine la structure du lipide a de b. Hinzii, differente de celle des autres lipides a du genre bordetella. Cette meme structure a ensuite ete retrouvee chez b. Trematum. Nous avons egalement obtenu le spectre de masse des lpss de b. Hinzii, a partir duquel a pu etre determinee la structure de son noyau oligosaccharidique. Les structures de ces lpss pourront ensuite etre comparees a celles des autres especes du genre bordetella, afin d'etablir une relation structure/activite.


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Informations

  • Détails : 178 p.
  • Annexes : 143 ref.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-014662
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