Etude par videomicroscopie de fluorescence de molecules individuelles d'interet biologique en interaction

par BENOIT LADOUX

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de JEAN-LOUIS VIOVY.

Soutenue en 2000

à Paris 7 .

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  • Résumé

    Ce travail a consiste a etudier differents systemes interrogeant les proprietes physiques ou biologiques de l'adn, que ce soient l'electrophorese ou la manipulation de molecules individuelles d'adn pour sonder certains aspects de la physique des polymeres ou certaines interactions de l'adn avec des proteines. Ce travail comporte plusieurs parties independantes. La premiere partie de ce travail a conduit a l'elaboration d'un systeme experimental simple etudiant les instabilites electrohydrodynamiques induites par des polyelectrolytes sous un champ electrique alternatif. Nous avons developpe un dispositif experimental pour etudier la deformation des molecules individuelles d'adn greffees a l'une de leurs extremites sur une surface et soumises un cisaillement hydrodynamique par videomicroscopie de fluorescence ainsi que les interactions de l'adn avec les histones a permis : les fluctuations thermiques auxquelles sont soumises les molecules couplees au cisaillement hydrodynamique engendrent un comportement dynamique inattendu de l'extremite qui effectue un cycle de recirculation au cours du temps. Nous nous sommes servis du dispositif mis en place pour etudier sur des molecules d'adn individuelles le processus d'assemblage de la chromatine, forme sous laquelle est present l'adn condense dans le noyau des cellules eucaryotes. L'adn, etire au prealable par l'ecoulement hydrodynamique, se condense lorsqu'il est mis en presence des agents capables de former la chromatine et nous avons analyse par microscopie de fluorescence et par microscopie a force atomique les cinetiques de compaction de l'adn. Ce travail s'acheve avec l'etude des interactions adn-reca et plus precisement du processus de recherche d'homologie, qui intervient notamment dans le brassage de l'information genetique. Il s'agit d'etudier sur des molecules individuelles l'interaction entre deux molecules d'adn, dont l'une est un complexe adn simple-reca, ayant des zones homologues.

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Informations

  • Détails : 202 p.
  • Annexes : 201 ref.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • Accessible pour le PEB
  • Cote : TS2000
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