Identification de facteurs moleculaires controlant l'accumulation de glucosides cyanogeniques dans le manioc

par IDA DOSSOU YOVO

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de MPOKO BOKANGA et de JACOB MIGNOUNA.

Soutenue en 2000

à Paris 7 .

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  • Résumé

    Ce travail se rapporte a la cyanogenese dans le manioc, en particulier a la biosynthese des glucosides cyanogeniques (linamarine). Une etude preliminaire de 14 varietes de manioc de potentiel cyanogene differents a demontre que le taux d'enzyme microsomale est independant du potentiel cyanogene observe dans les differents genotypes et que ce taux d'enzyme microsomale biosynthetique varie selon l'organe de synthese. Une approche moleculaire nous a permis de mieux comprendre le phenomene de cyanogenese dans le manioc. Ainsi, l'amplification de l'adn genomique par pcr a egalement montre que les genes cyp79d1 et cyp79d2 impliques dans la reaction de transformation de la l-valine en oxime lors de la biosynthese des glucosides cyanogeniques sont presents dans toutes les varietes de manioc (46 differents clones ont ete etudies au total). Puis, des travaux de rapd (adn polymorphe amplifie au hasard) ont permis de definir les relations phylogenetiques existant entre les differents cultivars etudies, et de demontrer l'existence de 9 marqueurs moleculaires dont 2 : opp15 6 5 0 et opt7 8 5 0 sont etroitement lies au caractere cyanogene. L'expression des genes cyp79d1 et cyp79d2 a ete etudiee par des experiences de northern blot sur ont montre des differences au niveau du taux d'expression des genes pour les 46 varietes etudiees. Les 2 genes sont hautement exprimes dans les varietes de potentiel cyanogene eleve et peu ou pas exprime dans les varietes de potentiel cyanogene faible. Les genes cyp79d1 et cyp79d2 ont ete amplifies par pcr dans des varietes de potentiel cyanogene eleve et faible. Les produits pcr ainsi obtenus ont ete clones dans le vecteur pbs. Des amorces specifiques mc1, mc2 et mc3 ont ete synthetisees pour pouvoir amplifier les differences d'adn entre les genotypes de manioc de potentiel cyanogene faible et ceux de potentiel cyanogene eleve.

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Informations

  • Détails : 211 p.
  • Annexes : 163 ref.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • Accessible pour le PEB
  • Cote : TS2000
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