Spermatogenese in vitro : localisation et quantification de l'expression de genes marqueurs des cellules germinales et premiers essais de culture des spermatogonies

par CECILE MARRET

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de PHILIPPE DURAND.

Soutenue en 2000

à l'ENSA RENNES .

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  • Résumé

    La spermatogenese est un processus complexe de multiplication et de differenciation cellulaire conduisant a la formation d'une cellules haploide : le spermatozoide. Dans la premiere partie de notre travail, nous avons etudies, au cours du cycle de l'epithelium seminifere du rat, l'expression de 4 genes (th2b, p19, tp1 et tp2) specifiques des cellules germinales. L'arnm du gene th2b est localise dans les spermatogonies b, les spermatocytes preleptotenes et les spermatocytes pachytenes des stades ii-iii au stade xiii. L'arnm du gene p 19 est localise dans les spermatocytes pachytenes des stades iii-iv au stade xiv et dans les spermatides aux stades 1-2. Les arnm des genes tp1 et tp2 sont localises respectivement dans les spermatides du stade 6 aux stades 15-16 et du stade 7 au stade 13. Ces resultats ont permis de valider l'utilisation de ces 4 genes pour caracteriser le passage de la meiose in vitro. Dans une deuxieme partie, nous avons etudie la multiplication des spermatogonies porcines dans 3 modeles de culture : la culture de spermatogonies purifiees, la co-culture de spermatogonies purifiees et de cellule de sertoli, et la culture de tubules seminiferes. Ce travail a permis de montrer que les communications intercellulaires ainsi que la presence d'une matrice extracellulaire sont 2 facteurs importants pour la multiplication des spermatogonies. De plus, le serum de veau ftal permet une meilleure survie des spermatogonies in vitro. L'ensemble de ce travail se replace dans un projet a long terme dont le but est d'utiliser les cellules germinales males comme vecteur cellulaire de transgenese.


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Informations

  • Détails : 156 p.
  • Annexes : 247 ref.

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  • Bibliothèque : AGROCAMPUS OUEST. Bibliothèque Générale de Rennes.
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