Régulation par les lymphocytes humains de la synthèse de prostacycline par les cellules endothéliales vasculaires

par Faten Merhi

Thèse de doctorat en Biochimie

Sous la direction de Annie-France Prigent.


  • Résumé

    Dans les conditions physiologiques, les cellules endothéliales fournissent une surface non adhésive et non tbrombotique aux cellules circulantes. Cette propriété est due entre autre à la synthèse d'agents antiagrégants tels que la prostacycline (PGI2). L'adhésion des cellules sanguines à l'endothélium est un phénomène commun aux processus de thrombose et d'inflammation. Les lymphocytes T du type CD3+ adhèrent aux cellules endothéliales dès les premières étapes de formation de la lésion athéromateuse. Nous avons étudié la régulation par les lymphocytes humains de la synthèse de prostacycline dans les cellules endothéliales de veine de cordon ombilical (HUVEC). Nous avons montré que les lymphocytes stimulent la synthèse de PGI2 par les HUVECs et que cette stimulation est fonction du nombre de lymphocytes ajoutés mais ne dépend pas de leur état physiologique. L'augmentation de la synthèse de PGI2 n'implique pas une synthèse de cytokines solubles mais un contact direct entre les deux types cellulaires est nécessaire. Par ailleurs, les lymphocytes ne régulent pas 1' expression des PGHS-1 et -2 dans les HUVECs. Dans un deuxième temps, nous avons identifié la voie de libération d'acide arachidonique (AA), à l'origine de l'augmentation de la synthèse de PGI2, dans les HUVECs en interaction avec les lymphocytes. Nous avons montré que la PLA2 cytosolique calcium-dépendante endothéliale est activée suite à un influx de calcium extracellulaire et une activation de la p42-MAPK et indépendamment d'une activation de la protéine kinase C. Nos résultats excluent l'implication d’une voie PLD/P A hydrolase/DAGlipase ou PLC/DAGlipase dans cette libération d'AA. Enfin, nous avons montré, à l'aide de cellules radiomarquées, que 1' AA qui est transformé en PGI2 est totalement d'origine endothéliale. Par contre, les lymphocytes contribuent à la synthèse de PGI2 en transformant une partie de la PGH2 endothéliale en PGI2, via un mécanisme transcellulaire

  • Titre traduit

    = Regulation of prostacyclin synthesis by human lymphocytes in vascular endothelial cells


  • Résumé

    Prostacyclin (PGI2), the main prostanoid synthesized by endothelial cells, contributes to maintain a non adhesive luminal surface in blood vessels due to its anti-platelet and vasodilatory properties. Increased adherence of leukocytes to the endothelium is one of the earliest events in atherogenesis. CD3+ T lymphocytes accumulate in early atherosclerotic lesions. We sought to determine whether peripheral blood lymphocytes may regulate the prostacyclin production of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). Cell-cell contact between HUVEC and lymphocytes significantly enhanced PGh synthesis as a function of the number of lymphocytes added. This stimulated synthesis is independent of soluble cytokines but required a direct cell-cell contact between the two cell types. It was not due to prostaglandin H synthase up-regulation as the expression of PGHS-1 was not altered and no induction of PGHS-2 could be observed. We also determined the contribution of phospholipase A2, C or D in lymphocyte-induced arachidonic release and PGh formation in HUVEC. Our data suggest that lymphocytes trigger an outside-in signaling in HUVEC involving the activation of cPLA2 and p42-MAPK but not PLD or PLC/DAG lipase and independent of PKC activation. Furthermore, Ca2 + entry from extracellular space is required to initiate arachidonic acid release and PGh synthesis. Finally, we demonstrate, using radio labeled cells that the arachidonic acid used ±or PGh synthesis was totally of endothelial origin. However, lymphocytes contribute to PGh synthesis by transforming a part of endothelial PGH2 to PGh, via a transcellular mechanism.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (193 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr.p.160-193

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  • Bibliothèque : Institut national des sciences appliquées (Villeurbanne, Rhône). Service Commun de la Documentation Doc'INSA.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : C.83(2411)
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