Selection et caracterisation de mutants de lactococcus lactis presentant une forte activite gazogene

par AISHA EL ATTAR

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales

Sous la direction de Georges Corrieu.

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  • Résumé

    La production de co 2 par les microorganismes presents dans les produit laitiers peut favoriser la formation d'ouvertures dans les fromages, ou conferer un caractere petillant aux laits fermentes. L'objectif de cette etude etait la selection et la caracterisation de mutants de lactococcus lactis subsp lactis biovar diacetylactis surproduisant du co 2 suite a l'attenuation de leur activite lactate deshydrogenase (ldh). La methode de selection des mutants est basee sur la realisation d'un criblage sur un milieu gelose contenant du chlorure de 2,3,5-triphenyl tetrazolium, puis d'une mesure de la production de co 2 par les clones formant des colonies brunes. La recherche de mutants spontanes, ainsi que l'utilisation de traitements mutagenes a la nitrosoguanidine et aux rayons uv, ont permis de constituer une collection de mutants gazogenes de l. I. I. Diacetylactis rd311. Lors de cultures dans du lait, les mutants les plus gazogenes produisent pres de 120 mm de co 2, alors que la production de la souche parentale n'est que de 18 mm. Le co 2 est essentiellement produit par action de l'alpha-acetolactate synthase, de l'alpha-acetolactate decarboxylase et de l'oxaloacetate decarboxylase. L'activite gazogene de 5 mutants stables a ete etudiee a l'aide d'un dispositif experimental permettant de suivre la concentration en co 2 dissous et la quantite de co 2 libere en phase gazeuse dans des conditions standardisees. Lors de cultures dans du lait, du co 2 n'est libere dans la phase gazeuse qu'a partir du moment ou la concentration en co 2 dissous atteint la saturation du milieu, soit une valeur proche de 29 mm. Sa liberation evolue ensuite de facon lineaire par rapport au ph. L'association de ces mutants avec une souche de l. Lactis acidifiante


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Informations

  • Détails : 126 p.
  • Annexes : 195 ref.

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