Etude comparative du facteur de transcription multimerique hap2/3/4/5p chez les levures saccharomyces cerevisiae et kluyveromyces lactis : caracterisation des domaines fonctionnels de la sous-unite regulatrice schap4p

par DENIS BOURGAREL

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de MONIQUE BOLOTIN FUKUHARA.

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  • Résumé

    Chez saccharomyces cerevisiae, une levure au metabolisme preferentiellement fermentaire, le facteur de transcription multimerique hap2/3/4/5p est necessaire pour la croissance sur substrats non fermentescibles. Une des sous-unites, la sous-unite hap4p est requise pour l'activation transcriptionnelle. Par ailleurs, cette meme proteine hap4p serait aussi la sous-unite regulatrice du complexe en reponse a la source du carbone. En effet, l'expression du gene hap4 est fortement induite sur source de carbone non fermentescible et lors de la transition diauxique. Afin d'etudier le mode d'action de la proteine hap4p, nous avons caracterise les homologues fonctionnels des genes hap4 et hap5 chez kluyveromyces lactis, une levure proche evolutivement de s. Cerevisiae, mais au metabolisme essentiellement respiratoire. D'autre part, nous avons realise une etude des domaines fonctionnels de la sous-unite hap4p par l'analyse de differents mutants hap4. Les resultats montrent l'importance de la petite region de 17 acides amines fortement conservee entre schap4p et l'homologue k. Lactis klhap4p et son role dans l'interaction de la sous-unite hap4p avec le complexe hap. Ils revelent que les 180 premiers acides amines sont suffisants pour permettre l'activation transcriptionnelle de certains genes cibles du complexe hap et la croissance sur milieux riches non fermentescibles. Le complexe hap est donc toujours fonctionnel en l'absence du seul domaine connu d'activation. Ces donnees suggerent une action du complexe hap en synergie avec d'autres activateurs transcriptionnels. Enfin, la recherche de suppresseurs multicopie d'un mutant hap4 a permis d'identifier differents genes suppresseurs impliques dans la voie ras-ampc. L'hypothese d'un role


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  • Détails : 203 p.
  • Annexes : 266 ref.

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