L'interaction tabac/phytophthora : dissection d'un modele complexe

par SEBASTIEN VAUTHRIN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de JEAN-PIERRE BLEIN.

Soutenue en 2000

à Dijon .

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  • Résumé

    Les elicitines, proteines secretees par les champignons du genre phytophthora, elicitent les mecanismes de defense du tabac, nicotiana tabacum var. Xanthi, sur plante entiere et sur suspension cellulaire. Ces proteines presentent egalement une activite de proteines de transfert de sterol. Au cours de ce travail, nous avons demontre que les elicitines sont capables de transferer des sterols entre des liposomes, des micelles et egalement entre des membranes biologiques. La mutagenese dirigee du gene x24 codant la cryptogeine, afin de remplacer les residus tyrosines intervenant dans la liaison du sterol a l'elicitine, nous a permis d'obtenir des elicitines aux capacites plus ou moins reduites a interagir avec des sterols. Nous avons ainsi pu demontrer l'existence d'une relation entre cette fonction et la capacite de fixation des elicitines sur leur site de fixation specifique situe sur la membrane plasmique des cellules de tabac. C'est en fait un complexe elicitine-sterol qui se fixe sur ces sites et non une elicitine non chargee. Nous avons ensuite demontre l'existence d'une relation entre la capacite de fixation des elicitines sur leurs sites a haute affinite et la capacite de ces proteines a induire les mecanismes de defense sur suspension cellulaire de tabac. Nous avons ainsi relie l'induction des mecanismes de defense et la fixation des elicitines sur ce qui semble donc etre leur recepteur membranaire capable de transmettre un signal du milieu extracellulaire vers le milieu intracellulaire. Nous avons par la suite etudie la capacite des elicitines a interagir avec d'autres lipides. Nous avons montre que les elicitines interagissent avec des acides gras et des phospholipides, transferant ces derniers entre des liposomes. Les elicitines semblent ainsi former une famille de proteines de transfert de lipides. Tout comme pour les sterols, ces autres lipides pourraient jouer un role dans la reconnaissance de l'elicitine par son recepteur. Enfin, le clonage, par la methode du double hybride, de l'adn c codant ce recepteur a permis de mettre en evidence la presence de plusieurs proteines affines pour la cryptogeine. Toutes ces proteines sont de nature intracellulaire, laissant envisage une eventuelle internalisation de l'elicitine dans les cellules vegetales.


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Informations

  • Détails : 164 p.
  • Annexes : 206 ref.

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  • Bibliothèque : Université de Bourgogne. Service commun de la documentation. Section Sciences.
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