Influence de l'annexine v sur la structure et la dynamique de membranes phospholipidiques modeles

• Auteur / Autrice : Olivier Saurel
• Direction : Alain Milon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

L'etude structurale des interactions proteines - membrane revet un caractere d'importance pour la comprehension de nombreux phenomenes biologiques. C'est le cas notamment de l'annexine v, une proteine cytosolique qui presente une activite de canal ionique voltage dependant in vivo. L'influence de l'annexine v sur la structure et la dynamique de membranes phospholipidiques modeles a ete etudiee par des techniques biophysiques complementaires : spectroscopie de fluorescence (retour de fluorescence apres photoaveuglement (frap) et polarisation de fluorescence), spectroscopie de resonance magnetique nucleaire des solides (rmn 3 1p, 2h). D'autre part, la localisation de la proteine par rapport a la bicouche a ete determinee par diffraction des neutrons. L'etude du complexe proteolipidique par rmn et par diffraction des neutrons a necessite le developpement d'une methode originale de preparation d'echantillons de bicouches phospholipidiques orientees en presence d'annexine v excluant l'utilisation de solvants organiques. L'ensemble des resultats est analyse au regard du temps caracteristique de chaque methode, ils sont accord avec un modele selon lequel l'annexine v forme de cristaux bidimensionnel a la surface de la bicouche par interaction specifique avec la phosphatidylserine. Cette interaction perturbe la dynamique des lipides vicinaux a la proteine creant trois populations distinctes en echange lents ( c > s). Ce modele est en accord avec les fonctions biologiques basees sur la depletion des ps de la bicouche liee l'interaction de l'annexine v.