Amelioration du lavandin par variation somaclonale et transformation genetique

par SANDRINE DRONNE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de MONIQUE COLSON.

Soutenue en 1999

à SAINT ETIENNE .

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  • Résumé

    Divers outils issus des biotechnologies vegetales ont ete etablis chez le lavandin (lavandula x intermedia emeric ex loiseleur). Un systeme de regeneration de plantes in vitro a ete developpe avec succes a partir de fragments foliaires chez cinq cultivars, avec des taux de multiplication oscillant entre 0,5 et 7,0. Ce systeme de regeneration a ensuite ete employe pour produire des variants somaclonaux. Leur identification precoce a ete realisee par cytometrie en flux et rapd (random amplified polymorphic dna). Chez le cultivar grosso 2, la frequence d'apparition de variants a ete estimee a 24%. Par ailleurs, la modification du genome nucleaire du lavandin a ete realisee par transformation genetique via agrobacterium tumefaciens, en utilisant les genes codant pour la -glucuronidase et la neomycine phosphotransferase ii. L'efficacite de transformation obtenue par cette methode est de 9%. L'integration et l'expression de ces transgenes ont ete etudiees par pcr (polymerase chain reaction), southern blot, rt-pcr (reverse transcriptase-pcr). Enfin, ce systeme de transformation a ete utilise pour introduire dans le genome du lavandin, le gene de mentha spicata codant pour la 4s-limonene synthase et precede d'un promoteur fort, dans le but de modifier qualitativement son huile essentielle. La disponibilite de ces differentes techniques permet d'envisager ulterieurement la creation de nouveaux cultivars presentant des caracteristiques agronomiques ameliorees. Ces travaux ouvrent aussi la voie a des etudes plus fondamentales telles que le clonage de monoterpene synthases, l'etude de leur localisation intracellulaire et de leur regulation au cours du developpement du lavandin.

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Informations

  • Détails : 208 p.
  • Annexes : 228 ref.

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  • Bibliothèque : Université Jean Monnet. Service commun de la documentation. Section Sciences.
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