La recombinaison homologue ches les mammifères : effet des protéines p53 et Bcl-2, du blocage de la réplication et des rayonnements ionisants

par Yannick Saintigny

Thèse de doctorat en Radiologie

Sous la direction de Bernard Lopez.

Le président du jury était Jean-Marc Cosset.

Le jury était composé de Bernard Lopez, Jean-Marc Cosset, Alain Puisieux, Giuseppe Baldacci, Miroslav Radman.

Les rapporteurs étaient Alain Puisieux, Giuseppe Baldacci.


  • Résumé

    Le contrôle du cycle cellulaire, associé aux mécanismes de réplication et de réparation/recombinaison permet aux cellules de maintenir leur intégrité génétique. La protéine p53 assure le contrôle de la transition G1/S. L'inactivation de cette protéine permettrait d'initier une réplication sur une matrice endommagée et de conduire à un arrêt des fourches de réplication. Cet arrêt provoquerait des cassures de l'ADN, bons substrats pour la recombinaison. Ce travail montre que l'expression de protéines p53 mutantes stimule la recombinaison homologue spontanée et radio-induite, indépendamment du contrôle du cycle cellulaire. De plus, l'utilisation d'une collection d'inhibiteurs de la réplication a permis de montrer que l'inhibition de l'élongation de la réplication stimulait plus fortement la recombinaison que l'inhibition de l'initiation. L'arrêt de la réplication par ces inhibiteurs augmente aussi significativement le nombre de cassures de l'ADN. Ces résultats ont mis en évidence un point d'action de la protéine p53 sur les étapes ultimes du mécanisme de recombinaison homologue. Enfin, l'expression de la protéine Bcl-2 inhibe l'apoptose et augmente la survie, mais inhibe spécifiquement la recombinaison conservative, aussi bien après une irradiation qu'en l'absence d'un stress apoptotique. L'extinction de ce mécanisme fidèle de réparation est associée à une augmentation de la mutagenèse. L'ensemble de ces résultats permet d'envisager le maintien de la stabilité du génome comme un réseau impliquant différents mécanismes cellulaires. Il en découle un modèle de progression tumorale à plusieurs étapes.


  • Résumé

    The control of cell cycle, associated with the mechanisms of replication, DNA repair/recombination allows the cells to maintain their genetic integrity. The p53 protein ensures the control of G1/S transition. Its inactivation would allow to initiate replication on damaged matrix and lead to the block of replication forks followed by DNA strand breaks, good substrates for recombination. This work shows that the expression of mutant p53 protein stimulates both spontaneous and radio-induced homologous recombination, independently of the control of cell cycle. Moreover, the use of a set of replication inhibitors show that inhibition of the replication elongation stimulates recombination more strongly than the initiation inhibition. Replication arrest by these inhibitors also significantly increases the number of DNA strand breaks. These results highlighted a point of action of p53 protein on the ultimate stages of the homologous recombination mechanism. Lastly, the expression of Bcl-2 protein inhibits apoptosis and increases survival, but specifically inhibits conservative recombination, after radiation as well as in absence of apoptotic stress. The extinction of this mechanism of DNA repair is associated with an increase of mutagenesis. Taken together, these results allow to consider the maintenance of the genetic stability as a cellular network involving different pathways. A multiple stages model for tumoral progression can be deduced.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (286 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 255-281

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  • Bibliothèque : Université de Paris-Sud (Le Kremlin-Bicêtre, Val-de-Marne). Service Commun de la Documentation. Section Médecine.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TD/1999T039
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 5103
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