Conception d'un reseau bidimensionnel d'acides nucleiques - micromanipulation et mesure de force par pinces magnetiques

par CHARLIE GOSSE

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de DAVID BENSIMON.

Soutenue en 1999

à Paris 6 .

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  • Résumé

    La conception d'un reseau bidimensionnel d'acides nucleiques a pour but de repondre aux nombreuses questions soulevees par l'etude theorique des membranes polymerisees et de leur transition de froissage. Les principales strategies de synthese ayant deja permis d'obtenir des polymeres 2d sont passees en revue et nous permettent de definir les etapes successives jalonnant notre travail de chimie supramoleculaire. Des monomeres composes d'une molecule lipidique fluorescente liee a trois brins oligonucleotidiques sont synthetises et leur organisation a une interface hydrophile/hydrophobe (micelles, membranes phospholipidiques) est etudiee par spectroscopie de fluorescence. A basse temperature, la polymerisation est induite par hybridation des sequences d'adn composant les differents monomeres complementaires. Ce phenomene de polycondensation, en solution ou a la surface des edifices membranaires utilises comme echaffaudage, est analyse par spectroscopie d'absorption uv et par gel retard. Dans une seconde partie, nous presentons la mise en uvre de pinces magnetiques, appareil permettant de manipuler des particules micrometriques en solution et de mesurer les forces qui leurs sont appliquees. Les objets magnetiques consideres sont observes par microscopie optique et deplaces grace a six electroaimants produisant les gradients de champ requis. Une boucle de retroaction couplant enregistrement de la position de l'objet manipule et controle des courants traversant les bobines permet de creer un puit de potentiel virtuel de raideur 10 - 7 n/m. Le deplacement de ce piege conduit a des mouvements de translation de la bille a la vitesse de quelques m/s. Le dispositif experimental autorise egalement les mouvements de rotation a la frequence d'une dizaine de hz. Une analyse du mouvement brownien des particules ou une prealable autocalibration du systeme contre la viscosite permet de mesurer des forces comprises entre 10 - 1 4 et 10 - 1 0 n.

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Informations

  • Détails : 145 p.
  • Annexes : 218 ref.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
  • Disponible pour le PEB
  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : PMC RT P6 1999
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