Role des regulateurs nucleaires rb et c-myc dans la differenciation des cellules epitheliales

• Auteur / Autrice : Éric Batsché
• Direction : CHANTAL CREMESI
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Les cellules epitheliales sont a l'origine de 90% des tumeurs humaines. Nous avons etudie le role dans les cellules epitheliales, de l'anti-oncogene rb et du proto-oncogene c-myc qui sont largement consideres comme des regulateurs ayant des effets antagonistes sur les processus cancerogenes. Il a ete montre au laboratoire que c-myc active l'expression de cytokeratines, proteines specifiques du cytosquelette des cellules epitheliales, et que l'expression de c-myc est constitutive et particulierement elevee dans un grand nombre de lignees cellulaires epitheliales. L'etude de la regulation de l'activite du promoteur du gene c-myc par rb a permis de montrer que ces deux genes n'ont pas obligatoirement des fonctions antagonistes, puisque rb peut activer la transcription de c-myc. Cet effet activateur de rb met en jeu tres probablement des sites pour le facteur de transcription sp1, et il masque l'effet represseur qu'exerce rb sur c-myc par l'intermediaire du facteur e2f. Par ailleurs, l'oncoproteine lt du virus sv40 inactivant rb, antagonise les effets activateur et inhibiteur de rb sur le promoteur du gene c-myc. L'inactivation des proteines de la famille rb, par lt induit dans les cellules epitheliales mdck plusieurs effets dont une repression de c-myc, la perte du phenotype epithelial, l'acquisition d'un fort pouvoir invasif et une apoptose massive a forte densite cellulaire. La re-expression des genes c-myc ou rb dans ces cellules transformees par lt induit la restauration partielle du phenotype epithelial et de la survie cellulaire. Rb et c-myc assurent le maintien de la differenciation epitheliale en activant, specifiquement dans les cellules epitheliales, la transcription du gene e-cadherine qui code une proteine d'adhesion intercellulaire cruciale pour la differenciation epitheliale, et qui se comporte comme un suppresseur de tumeur en diminuant le caractere invasif des cellules tumorales. Rb et c-myc agissent comme des co-activateurs du facteur de transcription ap-2 qui est important pour la differenciation epitheliale. Nous demontrons que rb et ap-2 s'associent in vivo et in vitro. Dans les cellules mdck transformees par lt un complexe lt/rb/ap-2 est mis en evidence. Par l'utilisation, de mutants de lt et de rb, nous montrons que l'inactivation par lt des fonctions d'ap-2, passe par l'interaction lt/rb. Par ailleurs, nous montrons que seul le gene c-myc sauvage codant les deux proteines c-myc1 et c-myc2 est capable de transactiver le promoteur e-cadherine, contrairement aux proteines c-myc1 ou c-myc2 isolees dont la surexpression aboutit a la repression de la e-cadherine. Nos resultats suggerent que le rapport entre ces deux proteines c-myc est essentiel pour les effets transactivateurs de c-myc et de rb. La repression du promoteur e-cadherine provoquee par les proteines c-myc1 ou c-myc2 met en jeu le facteur ap-2 dans les cellules epitheliales, et probablement l'element initiateur de facon independante du type cellulaire. Ainsi, notre travail demontre que les genes rb et c-myc agissent dans le meme sens pour etablir et/ou maintenir la differenciation epitheliale. Nos resultats decrivent un nouveau mode d'action des regulateurs nucleaires de rb et c-myc passant par ap-2. Les deregulations de ces fonctions, par l'inactivation de rb, ou par la pertubation du rapport entre les deux proteines c-myc1 et c-myc2, pourraient etre impliquees dans les processus de carcinogenese et d'invasion tumorale, notamment en diminuant l'expression de la e-cadherine.