Caracterisation in vivo du complexe d'elongation de la transcription chez escherichia coli

par NATHALIE ROBICHON

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales

Sous la direction de Rachid Rahmouni.

Soutenue en 1999

à Orléans .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Le complexe ternaire d'elongation (cte) compose de l'arn polymerase, de l'arn et de l'adn, constitue l'element cle de la regulation transcriptionnelle. L'arn polymerase doit en effet conjuguer une extreme stabilite et une mobilite pour pouvoir se deplacer sur sa matrice sans se dissocier de l'adn et de l'arn. Grace a un systeme permettant l'immobilisation du cte d'e. Coli in vivo, et en utilisant une panoplie de reactifs chimiques specifiques de l'adn et de l'arn ce travail a montre que le cte est instable et peut osciller entre un etat recule et un etat avance in vivo. Le recul du complexe s'accompagne d'un recul du site catalytique de l'arn polymerase. Un hybride adn/arn fort en 3' ou la formation d'une structure en tige/boucle dans l'arn inhibent le recul du cte et permettent d'isoler l'etat avance. Au contraire, l'utilisation d'un inhibiteur de l'elongation permet de mettre en evidence l'etat recule. Ce travail a egalement montre qu'il existe, in vivo, des interactions specifiques avec les proteines du cte au niveau du duplex d'adn en aval du site catalytique et au niveau du site catalytique. Ces interactions controleraient la stabilite du cte et pourraient constituer un element de la force motrice de l'arn polymerase pour permettre l'ouverture de la double helice d'adn.


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  • Détails : 165 p.
  • Annexes : 20 ref.

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