Caracterisation fonctionnelle de deux couples cdk-cycline, cdk7-cych et cdk8-cycc, chez la drosophile

par Vincent Leclerc

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de PIERRE LEOPOLD.

Soutenue en 1999

à Nice .

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  • Résumé

    La famille des kinases dependant des cyclines, cdk, a ete isolee pour son role dans le controle du cycle cellulaire. Il apparait maintenant que des cdk jouent un role dans d'autres processus cellulaires. J'ai travaille a l'identification de la fonction de deux couples cdk-cyclines chez la drosophile. La cycline c est un membre distant de la famille des cyclines dont la fonction est longtemps restee enigmatique. J'ai identifie cdk8, le partenaire kinase de cycline c. Les deux proteines forment in vivo un complexe stable comprenant la grande sous-unite de l'arn polymerase ii (pol ii). Cdk8-cycline c est capable de phosphoryler in vitro le domaine c-terminal (ctd) de la pol ii. Le complexe cdk8-cycline c joue donc, chez les eucaryotes superieurs, un role similaire a celui du complexe homologue srb10-srb11 chez la levure dans le controle de l'activite de la pol ii. Cdk7 et ses deux partenaires cych et mat1 ont ete isoles initialement pour leur capacite a phosphoryler et activer les cdk (activite cak pour cdk-activating kinase). Ces trois partenaires se retrouvent egalement au sein du facteur general de transcription tfiih, ou ils ont une activite ctd kinase. Cependant, la fonction physiologique de cdk7 reste controversee. Afin d'analyser la fonction cdk7 in vivo j'ai isole les adnc codant pour la kinase cdk7 de drosophile et son partenaire cycline h. J'ai realise des mutations dominantes negatives de la kinase (cdk7 d n). Leur expression dans l'embryon precoce n'induit pas de perturbation du cycle cellulaire. En revanche, les proteines cdk7 d n induisent un retard du demarrage de la transcription zygotique. Ces resultats sont, d'une part, une confirmation in vivo du role de cdk7 dans le controle de la transcription. D'autre part, ils suggerent fortement que cdk7 ne soit pas responsable de l'activite cak au cours des cycles mitotiques precoces. Une autre kinase, homologue de la kinase cak1 de s. Cerevisiae, pourrait assumer cette fonction.


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Informations

  • Détails : 213 p.
  • Annexes : 510 ref.

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