Régulation de l'activité des canaux potassiques végétaux : utilisation de la levure pour identifier des protéines interagissant avec le canal AKT1

par Anne-Garlonn Fonrouge-Desbrosses

Thèse de doctorat en Physiologie

Sous la direction de CLAUDE GRIGNON.

Soutenue en 1999

à Montpellier 2 .


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  • Résumé

    L'objectif de ce travail de these est l'identification de proteines regulant l'activite du canal d'arabidopsis akt1. Pour identifier des adnc dont le produit pourrait activer le canal akt1, nous avons co-exprime une banque d'expression d'adnc d'arabidopsis avec l'adnc akt1 dans une souche de levure deficiente pour le transport de potassium. L'expression de l'adnc akt1 dans cette souche de levure restaure le transport de k + et la capacite de croitre sur un milieu contenant une faible concentration en k + (100 m). L'expression d'akt1 augmente de plus la resistance de la levure au na +, car akt1 est hautement selectif du k + vis a vis du na +. Les adnc de plante ont ete selectionnes sur leur capacite a amplifier le phenotype confere par la presence d'akt1 sur le milieu k + 100 m et na + 300 mm, sur lequel les cellules transformees par akt1 seul ne sont plus capables de pousser. Nous avons trouve deux adnc (nomme aak, pour akt1 associated kinase, et taa1 pour transketolase akt1 associated) qui permettent la croissance des levures mutantes sur le milieu selectif quand ils sont co-exprimes avec akt1. Nous avons verifie que, en l'absence d'akt1, l'expression des adnc n'affecte pas la croissance de cellules transformees, en comparaison avec les levures transformees avec un plasmide vide, et ce, quelles que soient les concentrations externes de k + et na +. Des tests d'interaction en systeme double-hybride et des etudes de l'expression d'aak1 et taa1 dans la plante ont ete menees.

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Informations

  • Détails : [4], 95 f
  • Annexes : Bibliogr.: f. 83-95

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  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 99.MON-67
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