Transformation génétique du tournesol (Helianthus annuus L. ) par Agrobacterium tumefaciens et analyse de la descendance

par Olivier Lucas

Thèse de doctorat en Biologie moléculaire et cellulaire végétale

Sous la direction de Gilbert Alibert.

Soutenue en 1999

à Toulouse, INPT .

  • Titre traduit

    Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation on sunflower (Helianthus annuus L. ), analyse of the derived progeny


  • Résumé

    Les méthodes de transformation génétique du tournesol (Helianthus annuus L. ) sont depuis longtemps limitées par des problèmes liés à la régénération de plantes normales par embryogenèse ou organogenèse. Dans cette thèse différents protocoles de transformation génétique de tournesol (Helianthus annuus L. ) ont été envisagés, avec comme point commun l'utilisation de méristèmes comme cible de la transformation. En effet, le méristème de tournesol présente d'une part, une certaine capacité à l'organogenèse, et d'autre part, est capable de se developper rapidement en plante entière. Seule la stratégie associant la blessure par projection de microparticules sur des demi-apex, et la co-culture en présence d'agrobactéries a per mis de produire des tournesols génétiquement modifiés ayant intégré un ADN-T portant le gè́ne nptII conférant la résistance à la kanamycine et le gène uidA codant l'enzyme β-glucuronidase (GUS). Cinq de ces plantes ont donné une descendance transgénique. Des analyses moléculaires ont montré que les ADN-T sont le plus souvent intégrés dans le génome en plusieurs exemplaires distribués en différents locus. Ils sont transmis de génération en génération et une ségégation entre les différentes copies a été observée. Ainsi quatre plantes de génération T1 présentant des événements d'intégration unique et différents ont été caractérisé. Dans ce cas, la ségrégation de l'ADN-T se déroule de façon mendélienne et le gène uidA intégré se comporte comme un gène dominant. Des niveaux d'activité GUS variable ont été mesuré sur trois générations successives de plantes issues d'événements de transformation indépendants.

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Informations

  • Détails : 117 f.
  • Notes : Thèse confidentielle jusqu'en janvier 2001
  • Annexes : Bibliogr. f. 104-117

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Ecole nationale supérieure agronomique. Centre de documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1999INPT017A
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