Contribution a l'etude du mode d'action de la cryptogeine : effet sur la composition parietale et caracterisation du systeme producteur de formes actives de l'oxygene chez les cellules de tabac (nicotiana tabacum var. xanthi)

par FLORE KIEFFER

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Bernard F. Maume et de FRANCOISE SIMON-PLAS.

Soutenue en 1999

à Dijon .

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  • Résumé

    La cryptogeine, proteine secretee par phytophthora cryptogea, elicite les mecanismes de defense chez le tabac. Nous avons centre notre etude sur deux evenements precoces induits par la cryptogeine sur des cellules de nicotiana tabacum var. Xanthi : les modifications parietales et la caracterisation du systeme producteur de formes actives de l'oxygene. Nous avons observe que les cellules de tabac elicitees etaient refractaires a l'action des enzymes lytiques de degradation de la paroi. Nous avons alors montre la presence d'expansions fibrillaires, riches en composes pectiques faiblement methyles et en calcium, qui pourraient former un gel, diminuant ainsi l'accessibilite des enzymes a leur substrat. Nous avons egalement montre que le peroxyde d'hydrogene est accumule dans ces expansions fibrillaires, et de ce fait pourrait intervenir dans le renforcement parietal induit par la cryptogeine. La seconde partie de ce travail a ete de caracteriser le systeme producteur de formes actives de l'oxygene, chez le tabac. Pour cela, nous avons initie une etude immunologique et moleculaire. L'approche immunologique nous a permis de detecter des proteines de tabac specifiquement reconnues par des anticorps diriges contre certaines sous-unites de la nadph oxydase de neutrophile (p47 p h o x, gp91 p h o x, rho-gdi et rac2). L'etude de la dynamique de ce systeme au cours de l'elicitation semble indiquer que le systeme vegetal, producteur de formes actives de l'oxygene, est regule differemment de la nadph oxydase animale. Parallelement, nous avons utilise la methode du double-hybride en systeme heterologue afin de cloner des adnc codant des proteines de tabac similaires aux composants de la nadph oxydase de neutrophile. Nous avons ainsi isole un adnc de tabac codant une petite proteine g de la famille de rac grace a son interaction avec la proteine animale rho-gdi. Au cours de l'etude precedente, nous avons detecte, a l'aide de l'anticorps anti-rac2, une proteine de tabac, que nous avons appelee p21 f. L'etude plus approfondie de cette proteine montre qu'elle pourrait etre une petite proteine g. Nous avons egalement mis en evidence son changement de localisation cellulaire au cours de l'elicitation, ce qui nous a permis d'emettre l'hypothese que la proteine p21 f pourrait etre impliquee dans le signal d'elicitation induit par la cryptogeine.


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  • Détails : 162 p.
  • Annexes : 174 ref.

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