Metabolisme purique chez le pecher. Recherche d'enzymes marqueurs de potentialites de croissance des bourgeons : etude de l'adenine phosphoribosyltransferase et de l'adenosine nucleosidase

par Isabelle Lecomte

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de FRANCOIS LE FLOC'H.

Soutenue en 1999

à Clermont Ferrand 2 .

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  • Résumé

    Chez les plantes perennes, il existe une relation entre la regulation du contenu en nucleosides triphosphates apres un traitement exogene a l'adenosine et l'aptitude a la croissance des bourgeons (test nucleotides). Chez le pecher, l'adenosine exogene est preferentiellement recyclee en nucleotides adenyliques par une voie indirecte faisant intervenir une adenosine nucleosidase et une adenine phosphoribosyltransferase. Pendant plusieurs periodes automno-hivernales successives, l'examen de l'activite de ces enzymes a ete realise au niveau des bourgeons vegetatifs et floraux de cette espece vegetale. Un accroissement de l'activite adenosine nucleosidase des le mois d'octobre suivi d'une decroissance rapide en decembre, au moment de la levee de dormance, a ete constate. Cette baisse d'activite specifique n'ayant pas lieu en conditions de privation de froid, l'activite adenosine nucleosidase peut etre consideree comme un marqueur de la levee de dormance des bourgeons de pecher. L'activite aprtase augmente regulierement dans les deux types de bourgeons du mois d'octobre au mois de fevrier ou mars, ou elle atteint un maximum. Cette evolution fait d'elle un marqueur potentiel de la periode de post-dormance des bourgeons. Afin de preciser les roles respectifs de ces enzymes, leurs purifications ont ete entreprises, mais seule l'aprtase a pu etre purifiee a homogeneite et faire l'objet d'une etude plus approfondie. Sa masse moleculaire est estimee a 27,0 0,1 kda. Son ph optimal d'activite est de 8,5 et sa vitesse de reaction depend strictement de la presence de cations divalents (mn 2 + > mg 2 +). Elle presente de fortes specificite et affinite vis a vis de l'adenine (km = 0,74 m), mais des cytokinines comme la zeatine (km = 0,3 mm) et la benzyladenine sont egalement des substrats potentiels. Le km mesure vis a vis du prpp est de 20 m. L'adp et l'amp sont seuls inhibiteurs de la reaction, l'inhibition par l'amp etant de type competitif vis a vis du prpp. L'obtention d'anticorps polyclonaux anti-aprtase de pecher a permis d'effectuer en parallele des mesures de la quantite d'enzyme presente dans les bourgeons pendant la periode automno-hivernale. Cette etude demontre que l'elevation de l'activite specifique aprtase observee au cours de cette periode est correlee a une synthese accrue de l'enzyme dans les bourgeons vegetatifs et floraux. Grace a l'utilisation des anticorps, une observation des evolutions de la localisation intratissulaire de l'enzyme a egalement ete realisee. Une forte presence d'aprtase dans le tissu sous-jacent au bourgeon, confirmee par la mesure d'une activite specifique elevee dans ce territoire, caracterise un bourgeon vegetatif dormant. Un marquage intense au niveau des antheres en decembre correspond au moment ou apparait la meiose du bourgeon floral. Ces resultats ont permis une meilleure apprehension des roles respectifs de l'adenosine nucleosidase et de l'adenine phosphoribosyltransferase dans le determinisme physiologique de la dormance.


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Informations

  • Détails : 173 p.
  • Annexes : 212 ref.

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  • Bibliothèque : Bibliothèque Clermont Université (Aubière). Section Sciences et Techniques.
  • Disponible pour le PEB
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