Etude des activites adh, nad + kinase et g6pdh au cours de la germination du haricot (phaseolus vulgaris et p. Acutifolius) et effets de stress de deshydratation. Caracterisation des activites nad + kinase de haricot

par CHRISTINE STEPHAN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques fondamentales et appliquées

Sous la direction de DANIELLE LAVAL MARTIN.

Soutenue en 1999

à Angers .

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  • Résumé

    Au cours de la germination, trois activites enzymatiques ont ete etudiees dans les axes embryonnaires de p. Vulgaris et de p. Acutifolius : (1) les activites adh, presentes dans les graines seches, chutent apres emergence de la radicule ; (2) l'activite nad + kinase ca-cam independante soluble, qui croit jusqu'a emergence de la radicule, est ensuite remplacee par une forme ca-cam dependante soluble ; (3) l'activite nad + kinase ca-cam dependante membranaire augmente a partir de la gss (germination sensu stricto) pour representer 85% de l'activite totale en croissance (l'activite ca-cam independante restant inchangee) ; enfin, (4) l'activite g6pdh n'apparait qu'en fin de gss. Chez les deux especes, les activites adh, nad + kinase et g6pdh diminuent transitoirement en reponse aux stress de deshydratation appliques en gss. Appliques a emergence de la radicule, ces stress, qui ne modifient pas les activites de p. Vulgaris, provoquent des diminutions d'activites chez p. Acutifolius. L'activite adh, la moins perturbee par les divers traitements essayes (deshydratation, activateurs et inhibiteurs de la germination), semble essentielle au controle des phenomenes permettant l'emergence de la radicule. Par contre, les diminutions d'activites nad + kinase ca-cam dependante membranaire et g6pdh, pourraient permettre l'adaptation au stress de p. Acutifolius et joueraient un role important dans les syntheses necessaires a la croissance de la radicule. Pour les isoformes solubles ca-cam independante et dependante, des masses molaires de 200 et 900 kda ont ete determinees. Ces isoformes presentent des km de l'ordre de 1,3-1,7 mm pour l'atp et de 0,5-0,9 mm pour le nad +. Le pl de l'isoforme ca-cam independante est egal a 7. La forme ca-cam dependante membranaire est une proteine intrinseque de la membrane mitochondriale et peut etre activee et solubilisee partiellement par un melange nacl - tween 20. Une cam endogene est observee dans les fractions enrichies en membranes mitochondriales.

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  • Détails : 148 p.
  • Annexes : 167 ref.

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