Isolement et caractérisation des îlots de Langerhans de poulet : Etude de leur état fonctionnel

par Laurent Ruffier

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Jean Simon.

Soutenue en 1998

à Tours .


  • Résumé

    Mon travail à consisté à développer une méthode d'isolement des îlots de Langerhans chez le poulet. Dans cette espèce, contrairement aux mammifères, deux types d'îlots sont présents : des îlots a ou, a glucagon, des îlots b ou a insuline. Nous avons comparé deux grands types de méthodes d'isolement, mettant la collagénase directement au contact du pancréas finement cisaillé (Lacy et Kostianovsky, 1967) ou l'introduisant par les canaux pancréatiques (Horaguchi et Merrell, 1981). La dithizone utilisée chez les mammifères pour caractériser les cellules s'est avérée non sélective chez le poulet, colorant indifféremment les îlots a et b. En absence de coloration spécifique, aucun critère morphologique ne permet actuellement de distinguer les deux sortes d'îlots à l'état isolé. La nature des îlots a été précisée par immunohistochimie et par dosage radioimmunologique de l'insuline et du glucagon. La répartition des différents types d'îlots a été confirmée par une immunohistochimie (sur coupes de pancréas entier) : les îlots a sont principalement localisés dans les parties supérieures et les îlots b dans tout le pancréas. L'introduction de la collagénase par les canaux pancréatiques, suivie d'une digestion à 38°c (la moins traumatisante possible du pancréas) libère des îlots dont les capacités fonctionnelles sont maintenues. L'obtention exclusive d'îlots de type a à partir de la partie supérieure du corps du pancréas résulte vraisemblablement d'une particularité histologique des îlots a dont l'enveloppe est moins définie que celle des îlots b. Les îlots a obtenus sont sensibles à une augmentation de la concentration de glucose (de 14 a 42 mm) qui exerce un effet inhibiteur sur la libération de glucagon. La partie inférieure des lobes dorsaux et ventraux parait optimale pour obtenir une préparation d'îlots purs de type b. Ce travail ouvre la voie à de nouvelles recherches sur la physiologie et la biochimie des îlots de type a et de type b des oiseaux.


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Informations

  • Détails : 1 vol. (132 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 111-128.

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  • Bibliothèque : Université François Rabelais. Service commun de la documentation. Section Sciences-Pharmacie.
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