Caracterisation biochimique du produit d'un gene de tabac exprime lors de la reaction hypersensible et etude des voies de signalisation impliquees dans son expression

par EMMANUEL BAUDOUIN

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Benoît Ranty.

Soutenue en 1998

à Toulouse 3 .

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  • Résumé

    Dans le but de comprendre les mecanismes adaptatifs mis en place par les vegetaux lors de stress, le travail presente dans ce memoire a considere l'etude de la fonction du produit d'un gene de tabac, hsr203j, exprime lors de l'interaction incompatible avec la bacterie phytopathogene ralstonia solanacearum et les evenements de signalisation impliques dans son expression. L'analyse de la sequence peptidique deduite du gene hsr203j revele la presence d'un motif caracteristique des hydrolases a serine et des homologies partielles avec des lipases/esterases animales et bacteriennes. L'analyse fonctionnelle de la proteine recombinante obtenue par expression dans escherichia coli a permis d'etablir que hsr203j est une carboxylesterase de la famille des hydrolases a serine, qui hydrolyse preferentiellement des esters a courte chaine aliphatique. Sur la base d'homologies de sequence avec le gene hsr203j, des genes, provenant de differentes especes vegetales, ont ete isoles a partir des banques de sequences, et l'etude de leur profil d'expression suggere que cette famille enzymatique est impliquee dans le developpement et les phenomenes adaptatifs des plantes. L'etude de la regulation de l'expression du gene hsr203j a ete developpee sur des suspensions cellulaires de tabac, elicitees par un ester de phorbol, le 12-myristate, 13-acetate de phorbol (pma). Outre l'induction du gene hsr203j, le pma provoque une crise oxydative, se traduisant par une production de h#2o#2, et l'activation transitoire d'une proteine kinase presentant les caracteristiques d'une map kinase. L'etude de la sequence de ces evenements et de leur interdependance montre que (i) l'expression du gene hsr203j et l'activation de la map kinase sont dependants du stress oxydatif, (ii) l'expression du gene hsr203j et l'activation de la map kinase sont deux evenements independants. Ces resultats indiquent le role du stress oxydatif dans le controle de l'expression de genes et dans l'activation de phosphorylation en cascade. L'ensemble des resultats presentes constitue la premiere mise en evidence de l'intervention de carboxylesterases dans les processus de defense des plantes. L'etude realisee a, de plus, demontre l'existence d'un reseau de signalisation, aboutissant, d'une part a l'activation de map kinases, d'autre part a l'expression genique.


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Informations

  • Détails : 131 P.
  • Annexes : 393 REF.

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  • Bibliothèque : Université Paul Sabatier. Bibliothèque universitaire de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 1998TOU30046
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