Etude fonctionnelle des proteines apparentees a l'actine, arp2 et arp3 ; recherche de proteines interactant chez la levure saccharomyces cerevisiae

par AMMAR MADANIA

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Barbara Winsor.

Soutenue en 1998

à Strasbourg 1 .

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  • Résumé

    Ce travail porte sur la caracterisation de deux proteines apparentees a l'actine arp2 et arp3 (actin related protein), chez la levure s. Cerevisiae. Par l'analyse cytologique de mutants thermosensibles arp2 et arp3, nous avons montre que ces deux proteines sont essentielles pour l'organisation du cytosquelette d'actine et pour l'endocytose. Un crible double-hybride nous a permis d'identifier plusieurs partenaires d'arp2p , dont arp2p elle-meme, l'actine et le facteur d'elongation ef1, recemment identifie comme une proteine fixant l'actine. De plus, arp2p et arp3p interagissent genetiquement et dans le systeme double-hybride, confirmant l'existance de ces deux arps dans un complexe multiproteique. Nous avons montre que la surexpression de las17p est capable de supprimer d'une facon allele-specifique les defauts de croissance, d'organisation du cytosquelette d'actine et d'endocytose aussi bien de mutants arp2 que arp3 ts. De plus, arp2p, arp3p et las17p colocalisent avec les taches corticales d'actine. Las17p est homologue de la proteine wasp (wiskott-aldrich syndrome protein) impliquee dans une maladie genetique humaine d'immunodeficience. La deletion du gene las17 dans la levure entraine soit la letalite, soit la thermosensibilite, selon le contexte genetique. Les cellules las17 viables accumulent des agregats aberrants d'actine, semblables aux agregats observes dans les mutants arp2 et arp3 ts. Grace a un crible double-hybride, nous avons identifie des partenaires de las17p, dont l'actine, la verproline, et plusieurs proteines a domaine sh3, suggerant que las17p est impliquee dans des voies de signalisation et de regulation du cytosquelette d'actine. L'interaction de las17p avec lsb6p (l'homologue de cip4p humaine) suggere un lien entre las17p et cdc42p. Nos resultats convergent vers l'implication d'arp2p, arp3p et las17p dans l'organisation du cytosquelette cortical d'actine, probablement par un mecanisme de nucleation et de stabilisation des filaments d'actine.


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Informations

  • Détails : 150 P.
  • Annexes : 250 REF.

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Blaise Pascal.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.1998;2966
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