Contribution a la comprehension de la specificite d'aminoacylation de l'arne#a#r#g de levure

par MARIE SISSLER

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Catherine Florentz.

Soutenue en 1998

à Strasbourg 1 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Ce memoire s'inscrit dans le cadre de l'etude des regles qui regissent la specificite d'aminoacylation des arnt par les aminoacyl-arnt synthetases (aars). Cette reaction doit etre precise puisqu'elle determine la fidelite de la traduction de l'information genetique. Nous avons etudie le systeme de l'arginylation chez la levure, fonctionnellement relie a celui de l'aspartylation : l'arnt#a#s#p transcrit in vitro est un excellent substrat de l'arginyl-arnt synthetase (argrs). Les nucleotides responsables de la specificite d'arginylation ont ete recherches par l'analyse fonctionnelle de variants derives des arnt#a#s#p et arn#a#r#g. Nous avons identifies deux jeux de nucleotides differents, ce qui ebranle le concept d'unicite des jeux d'identite et pose le probleme de la reconnaissance specifique entre arnt et aars. La recherche de differences structurales intrinseques a chacune des molecules est restee infructueuse. Cependant, l'empreinte de l'argrs sur les molecules sauvage revele leur reconnaissance idiosyncrasique. Ces meme experiences, effectuees sur de variants mutes aux positions d'identite, devoilent des comportements differents ou seule l'adaptabilite du substrat a l'enzyme est affectee par la mutation dans le contexte homologue, alors que la mutation des positions d'identite perturbe a la fois le positionnement et l'adaptabilite dans le contexte non-homologue. L'analyse fonctionnelle de variants a mutations multiples confirme la dualite du mecanisme de reconnaissance par l'enzyme. En effet, l'echange des jeux d'elements d'identite dans leur ensemble rend chaque arnt hote tres efficace, cependant, de larges compensations des parametres cinetiques apparaissent. L'etudes de variants possedant les mutations intermediaires entre les molecules sauvages et transplantees devoile des effets anticooperatifs forts, sans doute du fait de l'introduction progressive du jeu d'identite alternatif. Ainsi, ces etudes sont en faveur de chemins mecanistiques alternatifs mis en oeuvre par les deux jeux d'elements d'identite afin de transmettre de maniere productive leur information au site actif de l'enzyme. Une derniere partie de ce travail concerne la mise au point d'une technique de selection d'arnt aminoacylables a partir d'une banque de molecules d'arn. L'objectif sera de trouver des substrats actifs de l'argrs.

  • Titre traduit

    Contribution to the understanding of the yeast trna#a#r#g aminoacylation specificity


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Informations

  • Détails : 386 P.
  • Annexes : 401 REF.

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service des bibliothèques. Bibliothèque L'Alinéa.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.1998;2887
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