Proprietes de liaison et regulations des recepteurs de l'inositol 1-4-5 trisphosphate de types 1 et 2 : etude comparee dans le foie et le cervelet

par LAURENT PICARD

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de JEAN-PIERRE MAUGER.

Soutenue en 1998

à Paris 11 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Le recepteur de l'inositol 1, 4, 5-trisphosphate (rinsp#3) permet de liberer le calcium stocke dans les compartiments intracellulaires. Trois types differents du rinsp#3 existent, cibles de nombreuses regulations. Le calcium peut, notamment reguler sa propre liberation dans les tissus ou se trouvent exprimes le rinsp#3. Les mecanismes permettant au calcium de moduler sa propre liberation necessite de connaitre les parametres de liaison specifique pour l'insp#3 de chaque isoforme du recepteur dans un environnement membranaire donne. Nous avons ainsi compare les affinites du recepteur de type 1 du cervelet avec celle du recepteur de type 2 du foie dans leur contexte membranaire et apres purification par immunoprecipitation. Dans les membranes le kd du recepteur du foie (47 nm) est plus eleve que le kd du recepteur de cervelet (25 nm). Par contre, apres solubilisation et immunoprecipitation, l'affinite du recepteur du foie est augmentee d'un facteur 10 alors que celle du recepteur du cervelet reste inchangee. De plus, un traitement des membranes de foie avec de faibles concentrations de triton x-100 qui ne solubilisent pas le recepteur mais perturbent l'organisation de la membrane, augmente l'affinite pour l'insp#3. Les isoformes 1 et 2 du rinsp#3 de foie et de cervelet ont donc des affinites differentes pour l'insp#3 et les proprietes de liaison du type 2 du foie sont regulees par son environnement membranaire. Nous avons etudie les effets du calcium sur la liaison d'#3hinsp#3 sur les recepteurs immunoprecipites de foie et de cervelet. La liaison d'insp#3 sur le recepteur purifie de foie reste insensible a l'addition de calcium alors que cette liaison est augmentee sur le recepteur membranaire. Cette perte de la sensibilite calcique sur le recepteur purifie de foie est reproduite par un traitement alcalin des membranes de foie. Dans les membranes de foie l'effet du calcium est donc medie par une proteine associee. Par contre le recepteur purifie de cervelet reste toujours sensible au calcium apres des traitements a ph alcalin ou hautes forces ioniques, indiquant qu'il est la cible directe du calcium. Des mecanismes differents de regulation de la liberation de calcium induits par l'insp#3 existent donc dans le cervelet et le foie. Ils sont lies a la presence d'isoformes specifiques du rinsp#3 dans ces tissus.

  • Titre traduit

    Binding properties and regulation of types 1 and 2 inositol 1-4-5 trisphosphate receptors: a comparative study in liver and cerebellum


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Informations

  • Détails : 277 P.
  • Annexes : 298 REF.

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  • Bibliothèque : Centre Technique du Livre de l'Enseignement supérieur (Marne-la-Vallée, Seine-et-Marne).
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH2014-013891
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