Reseau de controle des fonctions de l'element psam2 de streptomyces ambofaciens : regulation de la replication de l'integration/excision et du systeme kil-kor

par Guennadi Sezonov

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Clément.

Soutenue en 1998

à Paris 11 .

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  • Résumé

    Psam2 (10,9 kb) est un element genetique, integratif, conjugatif de streptomyces ambofaciens. Il combine certaines proprietes des bacteriophages temperes et des plasmides replicatifs conjugatifs. L'analyse fonctionnelle et la determination de sa sequence complete, a permis de dresser une carte physique et genetique de psam2. L'etude de mutants de psam2 chez lesquels la forme libre coexiste de facon stable avec la forme integree, a conduit a l'identification du gene activateur de la replication pra. La replication ne constitue pas pour cet element un moyen de se maintenir dans le mycelium lors de la division cellulaire mais est une etape du transfert. Cela explique aussi la presence du gene repsa dans le meme operon que les genes xis et int codant pour l'integration/excision, indispensable pour le transfert. Cet operon est positivement regule par le gene pra. Le gene korsa semble coder pour un represseur principal de psam2 bloquant l'expression de pra et rendant ainsi impossible l'activation des autres fonctions majeures de psam2. Korsa est egalement capable de reguler sa propre synthese. Elle est capable de se fixer dans les regions promotrices des genes pra et korsa. Les positions et les sequences de tous les sites de fixation de korsa dans psam2 ont ete determinees. Nous avons demontre que le gene principal du transfert trasa n'est pas regule directement par la proteine korsa ce qui constitue une difference tres sensible entre l'organisation du systeme kil-kor chez psam2 et celle des systemes kil-kor caracterises chez les autres elements conjugatifs des actinomycetes. La caracterisation des principales fonctions de psam2 a permis la construction d'une serie de vecteurs integratifs presentant une tres bonne stabilite et adaptes pour un usage dans des souches industrielles. L'utilisation d'un de ces vecteurs a permis, en clonant des genes de biosynthese de la pristinamycine de modifier la production de cet antibiotique par s. Pristinaespiralis.


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  • Détails : 219 P.
  • Annexes : 322 REF.

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  • Cote : TH2014-013659
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