Apport des techniques d'hybridation in-situ fluorescente (fish) dans les hemopathies malignes

par KATRINA RACK

Thèse de doctorat en Sciences médicales

Sous la direction de Elizabeth Macintyre.

Soutenue en 1998

à Paris 7 .

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  • Résumé

    La detection des anomalies cytogenetiques par hybridation in-situ fluorescente (fish) permet non seulement de confirmer les resultats du caryotype, mais aussi d'identifier de nouveaux remaniements. Le but de ce memoire a ete double : 1) evaluer la validite de la fish pour la detection d'anomalies chromosomiques specifiques en routine. Deux rearrangements, l'inversion du chromosome 16, inv(16)(p13q22) et les rearrangements de la bande 11q23 au niveau du locus mll ont ete valides et ont montre de facon claire l'interet de la fish et ses limites. 2) developper des sondes permettant la detection de remaniements impliquant les genes qui codent pour les recepteurs a l'antigene, frequemment implique dans les hemopathies lymphoides. Nous avons etudie le locus du gene de la chaine lourde des immunoglobulines (igh) sur le chromosome 14q32, et celui du recepteur tcr / sur le chromosome 14q11. Un yac contenant 70% du tcr / a ete utilise pour la detection des rearrangements du locus dans plusieurs proliferations lymphoides t. Cette approche a permis d'augmenter le taux de detection d'anomalies et de mieux caracteriser des rearrangements complexes. Deux approches ont ete developpees pour identifier les remaniements du locus igh. La premiere a ete de rechercher les rearrangements igh en utilisant differentes sondes du seul locus igh. Il est alors possible d'identifier de tels remaniements sur metaphases et sur noyaux interphasiques. Cependant la grande taille du locus igh, la recombinaison vdj et le commutation isotypique constituent des ecueils a l'utilisation de la fish, en particulier sur interphase. La seconde approche a ete de detecter les anomalies en utilisant deux sondes, l'une contenant igh, l'autre une region du chromosome partenaire, situee au niveau du point de cassure. Cette approche a demontre sans ambiguite, la presence d'un remaniement specifique d'igh. Les sondes developpes lors de ce travail faciliteront l'analyse moleculaire d'hemopathies malignes.


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Informations

  • Détails : 241 p.
  • Annexes : 302 ref.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • Accessible pour le PEB
  • Cote : TS1998
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