La reparation des bases oxydees chez la bacterie radio-resistante deinococcus radiodurans

• Auteur / Autrice : CECILE BAUCHE
• Direction : JACQUES LAVAL
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

D. Radiodurans est une bacterie capable de supporter, sans perte de viabilite ni mutagenese, l'action de nombreux agents endommageant l'adn, comme les radiations ionisantes et les rayonnements uv. Afin de caracteriser le mecanisme de reparation des purines oxydees chez d. Radiodurans, nous avons entrepris la purification de l'activite fapy-adn glycosylase. Nous avons montre que cette bacterie possede deux glycosylases excisant les residus fapy et 8-oxog de l'adn, toutes deux presentant une activite ap-lyase associee (procedant par un mecanisme de beta, delta-elimination). La premiere enzyme presente des constantes cinetiques d'excision des residus fapy et 8-oxog similaires a celles de la proteine fpg de e. Coli. Le gene correspondant a cette proteine, homologue du gene fpg de e. Coli, a ete clone, et la proteine correspondante, drfpg, a ete purifiee. Nous avons montre que ses specificites de substrats etaient differentes de celles de la proteine fpg de e. Coli. (reconnaissance des mesappariements 8-oxog/a, preference pour les residus fapyguanine et fapyadenine, et affinite plus faible pour les residus 8-oxog). La seconde enzyme presente une affinite plus faible pour les residus fapy et 8-oxog, mais possede une activite glycol de thymine adn glycosylase associee. Le gene codant pour cette proteine n'a pas encore ete identifie. Nous avons clone le gene nth de d. Radiodurans, et purifie la proteine correspondante (drnth), et la caracterisation des proprietes de cette enzyme est en cours de realisation. Nous avons donc montre que d. Radiodurans possedait un systeme de reparation par excision de base des bases oxydees, mais que les proteines le constituant paraissent etre plus complexes que celles identifiees chez les autres organismes. De plus, etant donne la faible affinite de ces proteines pour les residus 8-oxog, il est vraisemblable qu'il doive exister chez cette bacterie d'autres proteines ou d'autres mecanismes intervenant dans l'elimination de ces lesions.