Cartographie du gene de la testicane et contribution a l'etude de son expression

• Auteur / Autrice : Frédéric Charbonnier
• Direction : Claude-Louis Gallien
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et moléculaire
• Date : Soutenance en 1998
• Etablissement(s) : Paris 5

Mots clés

Mots clés contrôlés

Adénocarcinome

Protéoglycanes

Expression des gènes

Cancérogenèse

Résumé

Les proteoglycanes sont des macromolecules composees d'un squelette proteique sur lequel sont lies de facon covalente des chaines polysaccharidiques particulieres, les glycosaminoglycanes. Leur role est associe aux processus cellulaires fondamentaux : proliferation, adhesion et migration cellulaire. Dans notre laboratoire, un peptide portant des chaines de chondroitine et d'heparane sulfate ete isole du plasma seminal humain. L'adn complementaire generant ce peptide a ete clone, permettant d'etablir la sequence proteique deduite complete d'une nouvelle molecule, la testicane. Un clone, presentant une insertion de 112pb dans la phase codante de la molecule et une region 3' non codante ecourtee, a ete caracterise. La realite de ce transcrit a ete demontree par rt-pcr et l'exon alternatif codant pour cette insertion a ete caracterise. La cartographie complete de ce gene et sa localisation chromosomique ont ete etablies. La testicane humaine est codee par un seul gene, localise sur le chromosome 5q bande 31 et est compose de douze exons, pour une taille evaluee a plus de 100kb. Une analyse par northern blot sur un ensemble representatif de tissus humains a mis en evidence un arn messager majoritaire de 5,2kb, au niveau du tractus genital et notamment dans la prostate. Un anticorps dirige contre la region n-terminale de la testicane a ete realise. Une analyse immunohistochimique a permis de localiser la testicane au niveau du tissu epithelial prostatique, cible privilegiee des neoplasies. Cette expression a ete confirmee par hybridation in situ, dans les tissus sains et cancereux, pour les deux types de transcrits. Sur un ensemble de sept tissus pathologiques, une analyse par western, a permis de mettre en evidence, dans un seul cas, une proteine de mobilite electrophoretique inattendue. Une analyse au niveau du gene de ce patient, atteint d'une forme severe de cancer hormono-independant de la prostate, a permis de caracteriser, sur un des alleles, une deletion de 19pb dans l'exon episse alternativement.