Caracterisation biochimique et moleculaire des -glucosidases chez le noyer (juglans regia l. ) : relations avec la rhizogenese adventive et le metabolisme des naphtoquinones

par LAURENT DUROUX

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie

Sous la direction de Francis Delmotte.

Soutenue en 1998

à Orléans .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Chez le noyer (juglans sp. ), le caractere aleatoire de l'enracinement des microboutures limite la mise au point d'une methode industrielle de multiplication in vitro de plants selectionnes. Afin d'augmenter et regulariser l'enracinement de ces plants, nous avons cherche a mieux comprendre les mecanismes physiologiques inherents au processus de rhizogenese adventive. L'expression de proteines enzymatiques au cours de l'etape d'initiation de la rhizogenese adventive a ete etudiee sur un modele d'etude experimental. Ce modele est base sur la culture in vitro de fragments de cotyledons de noix, regenerant systematiquement des racines adventives. Nous avons montre qu'une forte activite -glucosidase, composee de 7 polypeptides, etait exprimee dans la zone rhizogene (zir), au cours de l'etape d'initiation. Un inhibiteur de ces enzymes, la d-glucono-1,5-lactone, inhibe la formation des racines adventives, laissant supposer une implication possible des -glucosidases dans le processus. Notre travail s'est alors oriente vers la purification de ces enzymes. Nous avons isole une -glucosidase (wbg8. 9) ayant une forte affinite pour l'hydrojuglone-glucoside et liberant de la juglone in vitro. La juglone s'accumule effectivement dans les tissus de la zir et pourrait jouer un role dans la differenciation cellulaire au cours de la formation du primordium. Apres micro-sequencage peptidique de wbg8. 9 et conception d'oligonucleotides degeneres specifiques, le clonage du gene codant wbg8. 9 a ete entrepris et deux fragments d'adnc ont ete obtenus par pcr. La sequence peptidique deduite de ces fragments presente une forte homologie avec des micro-sequences peptidiques internes a wbg8. 9. L'obtention de sondes nucleiques correspondant a wbg8. 9 et la poursuite des premieres approches d'histolocalisation (enzyme, substrat et produit de la reaction) nous permettront de mieux comprendre le role de cette enzyme dans le processus de differenciation cellulaire lie a la rhizogenese adventive.

  • Titre traduit

    Biochemical and molecular characterization of -glucosidases in walnut (juglans regia l. ). Relations to adventitious root formation and naphthoquinones metabolism


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Informations

  • Détails : 203 P.
  • Annexes : 160 REF.

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